TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：脯氨suan（PRO）含量測(cè)試盒 規(guī)格：可見(jiàn)分光光度法 測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒 規(guī)格：100管/48樣 測(cè)試方法：微量法
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24樣 測(cè)試方法：紫外分光光度法
二an氧化mei測(cè)試盒 規(guī)格：100管/48樣 測(cè)試方法：微量法
二an氧化mei測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24樣 測(cè)試方法：可見(jiàn)分
操作步驟：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit | 20次|50次 | FS-X9538 |
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于待檢測(cè)的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過(guò)生物su標(biāo)記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測(cè)20個(gè)樣品。 試劑盒組分： TdT酶———————————40μl Biotin-dUTP————————960μl TdT酶稀釋液(選用)—————500μl Streptavidin-HRP——————22μl Streptavidin-HRP稀釋液———1ml DAB顯色液A————————6ml DAB顯色液B————————6ml 標(biāo)記反應(yīng)終止液——————6ml 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時(shí)，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化下加上生物su(Biotin)標(biāo)記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Streptavidin(Streptavidin-HRP)結(jié)合，后在HRP的催化下通過(guò)DAB顯色來(lái)顯示凋亡細(xì)胞，從而可以通過(guò)普通光學(xué)顯微鏡檢測(cè)到凋亡的細(xì)胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。 本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)： (1)高靈敏度：背景染色極低，陽(yáng)性染色強(qiáng)，可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)到細(xì)胞凋亡，同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測(cè)到早期的細(xì)胞凋亡。 (2)特異性好：TUNEL檢測(cè)時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。 (3)快速：僅需約2-3個(gè)小時(shí)即可完成。 (4)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 TUNEL法特異性檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會(huì)檢測(cè)出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開(kāi)，另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。 極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒(méi)有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測(cè)。在個(gè)別類(lèi)型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測(cè)呈陽(yáng)性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，好同時(shí)檢測(cè)多個(gè)凋亡指標(biāo)。 儲(chǔ)存條件：-20℃。 |
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
性磷suanmei(ALP)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：ALP ELISA Kit，ALP，
激su敏感脂肪mei(HSL)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：HSL ELISA Kit，HSL，
肌suan激mei同工meiBB(CK-BB)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：CK-BB ELISA Kit，CK-BB，
紅細(xì)胞刺激因子(ESF)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：ESF ELISA Kit，ESF，
胱抑suF(CST7)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：CST7 ELISA Kit，CST7，
過(guò)氧化mei(GSH-Px)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：GSH-Px ELISA Kit，GSH-Px，
髓鞘蛋白P0(MPZ)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：MPZ ELISA Kit，MPZ，
腎損傷分子1(Kim-1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：Kim-1 ELISA Kit，Kim-1，
瘦su受體(LEPR)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：LEPR ELISA Kit，LEPR，
傷寒抗體(St-Ab)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：St-Ab ELISA Kit，St-Ab，
妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：SP1/PSβ1-G ELISA Kit，SP1/PSβ1-G，
趨化因子(CCL5/RANTES)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：CCL5/RANTES ELISA Kit，CCL5/RANTES，
前膠原C端肽mei(PCP)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：PCP ELISA Kit，PCP，
牛兒基焦磷suan合mei(GGPS1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：GGPS1 ELISA Kit，GGPS1，
尿蛋白(UP)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：UP ELISA Kit，UP，
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：TCC C5b-9 ELISA Kit，TCC C5b-9，
美洲商陸su(PWM)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng)：PWM ELISA Kit，PWM，
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)百里酚標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱(chēng)：Thymol
碘克沙chun相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng)：
他zuo巴坦suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng)：Tazobactam
異抗壞血suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng)：Erythorbic Acid
拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng)：Mesalamine
去jia替林鹽suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng)：Nortriptyline Hydrochloride
5-ben基海因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng)：5-Phenylhydantoin
辛普利鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng)：Fosinopril Sodium
相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱(chēng)：
ben海拉明檸檬suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱(chēng)：Diphenhydramine Citrate
