一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)公司正在出售的產品：過氧化物mei（POD）測試盒 規(guī)格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法
過氧化氫（H2O2）試劑盒 規(guī)格：100管/96樣 測試方法：微量法
過氧化氫（H2O2）測試盒 規(guī)格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法
丙二醛（MDA）試劑盒 規(guī)格：100管/96樣 測試方法：微量法
丙二醛（MDA）測試盒 規(guī)格：5
產品介紹：
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織，只要經過一步染色反應，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 試劑盒組份： TdT酶——————————40μl 熒光標記液————————960μl TdT酶稀釋液(選用)————500μl 細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實際上大多數情況下所謂的FITC即為fluorescein。 本試劑盒有如下優(yōu)點。 (1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色明亮，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。 (2)特異性：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。 (3)快速：僅需約1-2個小時即可完成。 (4)方便：只需一步染色反應，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進行多步操作。 (5)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。 TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。 極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發(fā)現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，好同時檢測多個凋亡指標。 儲存條件：-20℃。 |
產品屬性：
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 產品貨號 |
One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit | 20次|50次 | FS-X9536 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
轉化生長因子β受體Ⅰ(TGFβR1)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorBetaReceptorI(TGFbR1)
β-1,4-半乳糖轉移mei1(β4GALT1)檢測試劑盒 forBeta-1,4-Galactosyltransferase1(b4GALT1)
白介su10受體β(IL10Rβ)檢測試劑盒 forInterleukin10ReceptorBeta(IL10Rb)
基質金屬蛋白mei11(MMP11)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase11(MMP11)
絲氨suan蛋白mei肽mei抑制因子B支成員13(SERPINB13)檢測試劑盒 forSerpinPeptidaseInhibitorCladeBMember13(SERPINB13)
B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激meiβ(IκBKβ)檢測試劑盒 forInhibitorOfKappa-LightPolypeptideGeneEnhancerInB-CellsKinaseBeta(IkBKb)
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒 forAmyloidBetaPeptide1-42(Ab1-42)
基質金屬蛋白mei7(MMP7)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase7(MMP7)
胃動su(MTL)檢測試劑盒 forMotilin(MTL)
音猬因子(SHH)檢測試劑盒 forHedgehogHomolog,Sonic(SHH)
脂聯(lián)su(ADP)檢測試劑盒 forAdiponectin(ADP)
細胞色suP450家族成員1B1(CYP1B1)檢測試劑盒 forCytochromeP4501B1(CYP1B1)
線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測試劑盒 forUncouplingProtein1,Mitochondrial(UCP1)
細胞周期suL1(CCNL1)檢測試劑盒 forCyclinL1(CCNL1)
B-細胞連接蛋白(BLNK)檢測試劑盒 forB-CellLinkerProtein(BLNK)
癌胚抗原(CEA)檢測試劑盒 forCarcinoembryonicAntigen(CEA)
嗜suan性粒細胞過氧化物mei(EPX)檢測試劑盒 forEosinophilPeroxidase(EPX)
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)纖維醋法酯標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Cellacefate
纖維醋丁酯標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱：Cellaburate
醋suan纖維su標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Cellulose Acetate
微晶纖維su標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：
纖維su粉標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：Powdered Cellulose (AS)
羧jia基纖維su鈉標準品 規(guī)格:1．5g 英文名稱：Carboxymethylcellulose Sodium
交聯(lián)聚維tong標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Povidone
交聯(lián)聚維tong對照品標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Crospovidone
聚異丁烯標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：Polyisobutylene
聚乙suan乙烯酯標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：Polyvinyl Acetate
