TUNEL檢測(cè)陽性對(duì)照制備試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品：轉(zhuǎn)氫mei-2試劑盒 規(guī)格：50管/48樣 測(cè)試方法：紫外分光光度法
線粒體分離和線粒體mei提取試劑盒 規(guī)格：50管/48樣 測(cè)試方法：差速離心法
超氧化物歧化mei（SOD）試劑盒 規(guī)格：100管/96樣 測(cè)試方法：微量法
超氧化物歧化mei（SOD）測(cè)試盒 規(guī)格：50管/48樣 測(cè)試方法：可見分光光度法
過氧化氫mei（CAT）試劑盒
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒可以用于TUNEL檢測(cè)陽性對(duì)照的制備，制備后的陽性對(duì)照可以用于一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT135)的熒光，也可以用于顯色法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT137)的顯色檢測(cè)。DNase I可以剪切基因組DNA，使基因組DNA產(chǎn)生片段化(fragmentation)?；蚪M被片段化的細(xì)胞在用TUNEL法檢查時(shí)會(huì)呈陽性染色。本試劑盒足夠制備10個(gè)陽性對(duì)照。 試劑盒組份： DNase I—————————10μl Reaction Buffer(10X)——200μl 注意事項(xiàng)：需自備用于TUNEL檢測(cè)的組織切片、或培養(yǎng)細(xì)胞的片子。需自備TUNEL檢測(cè)試劑盒。 |
中文名稱：TUNEL檢測(cè)陽性對(duì)照制備試劑盒
英文名稱：Positive control preparation kit for TUNEL detection
產(chǎn)品規(guī)格：10次
貨號(hào)：FS-X9535
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
RNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)檢測(cè)試劑盒 forRNABindingMotifProtein24(RBM24)
神經(jīng)型一氧化氮合mei(NOS1)檢測(cè)試劑盒 forNitricOxideSynthase1,Neuronal(NOS1)
載脂蛋白C1(APOC1)檢測(cè)試劑盒 forApolipoproteinC1(APOC1)
粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒 forMucin1(MUC1)
細(xì)胞色suP450家族成員26A1(CYP26A1)檢測(cè)試劑盒 forCytochromeP45026A1(CYP26A1)
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測(cè)試劑盒 forCadherin,Epithelial(CDHE)
胰高血糖su樣肽1(GLP1)檢測(cè)試劑盒 forGlucagonLikePeptide1(GLP1)
腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)檢測(cè)試劑盒 forPalate/LungAndNasalEpitheliumAssociatedProtein(PLUNC)
腺高半胱氨suan水解mei(AHCY)檢測(cè)試劑盒 forAdenosylhomocysteinase(AHCY)
脫氧核糖核suanmeiⅠ樣2(DNASE1L2)檢測(cè)試劑盒 forDeoxyribonucleaseILikeProtein2(DNASE1L2)
白介su6(IL6)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin6(IL6)
結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)檢測(cè)試劑盒 forConnectiveTissueGrowthFactor(CTGF)
Pim-3原癌基因(PIM3)檢測(cè)試劑盒 forPim-3Oncogene(PIM3)
膜聯(lián)蛋白A7(ANXA7)檢測(cè)試劑盒 forAnnexinA7(ANXA7)
血管生成su2(ANGPT2)檢測(cè)試劑盒 forAngiopoietin2(ANGPT2)
肝配蛋白A3(EFNA3)檢測(cè)試劑盒 forEphrinA3(EFNA3)
羧suan酯mei3(CES3)檢測(cè)試劑盒 forCarboxylesterase3(CES3)
TUNEL檢測(cè)陽性對(duì)照制備試劑盒葡聚糖40系統(tǒng)適用性用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Dextran 40 System Suitability
葡聚糖70標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Dextran 70
葡聚糖70系統(tǒng)適用性用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Dextran 70 System Suitability
右旋糖酐死體積標(biāo)記物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran Vo Marker
葡聚糖4校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran 4 Calibration
葡聚糖10校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran 10 Calibration
葡聚糖40校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran 40 Calibration
葡聚糖70校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran 70 Calibration
葡聚糖250校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Dextran 250 Calibration
花旗參精粉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1．5g 英文名稱：
