Annexin V-EGFP細胞凋亡檢測試劑盒公司正在出售的產品：線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ/細胞色suC氧化mei測試盒 規(guī)格： 100管/96樣 測試方法：微量法
線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ/細胞色suC氧化mei測試盒 規(guī)格：25管/24樣 測試方法：可見分光光度法
線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ/ATP合mei/三磷suan腺合mei測試盒 規(guī)格：100管/48樣 測試方法：微量法
線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ/
產品屬性：
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 產品貨號 |
Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit | 20次|50次 | FS-X9534 |
產品介紹：
本試劑盒是用EGFP標記的重組人Annexin V來檢測細胞凋亡時出現在細胞膜表面的磷酯酰絲氨suan的一種細胞凋亡檢測試劑盒。一個包裝的本試劑盒共可以檢測20個樣品。可以使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。 試劑盒組份： Annexin V-EGFP—————————100μl Annexin V-EGFP結合液——————12ml 碘化丙啶染色液—————————220μl Annexin是一類廣泛分布于真核細胞細胞漿內鈣離子依賴的磷酯結合蛋白，參與細胞內的信號轉導。但僅Annexin V被報道可以調控一些PKC的活性。 Annexin V選擇性結合磷酯酰絲氨suan(phosphatidylserine，簡稱PS)。磷酯酰絲氨suan主要分布在細胞膜內側，即與細胞漿相鄰的一側。在細胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細胞都會把磷酯酰絲氨suan外翻到細胞表面，即細胞膜外側。磷酯酰絲氨suan暴露到細胞表面后會促進凝血和炎癥反應。而Annexin V和外翻到細胞表面的磷酯酰絲氨suan結合后可以阻斷磷酯酰絲氨suan的促凝血和促炎癥反應活性。 用帶有綠色熒光的熒光探針EGFP標記的Annexin V，即Annexin V-EGFP，就可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷酯酰絲氨suan的外翻這一細胞凋亡的重要特征。 本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞，呈現紅色熒光。對于壞死細胞，由于細胞膜的完整性已經喪失，Annexin V-EGFP可以進入到細胞漿內，與位于細胞膜內側的磷酯酰絲氨suan結合，從而也使壞死細胞呈現綠色熒光。 綜上所述，用Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色后，正常的活細胞不被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色；凋亡早期的細胞僅被Annexin V-EGFP染色，碘化丙啶染色呈陰性；壞死細胞和凋亡晚期的細胞可以同時被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色。 儲存條件：4℃避光，有效期6個月。 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
核糖核suan外切mei3(ERI3)檢測試劑盒 forExoribonuclease3(ERI3)
高爾基體蛋白A4(GOLGA4)檢測試劑盒 forGolginA4(GOLGA4)
無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒 forWinglessTypeMMTVIntegrationSiteFamily,Member3A(WNT3A)
防御suβ121(DEFβ121)檢測試劑盒 forDefensinBeta121(DEFb121)
氨jia基轉移mei(AMT)檢測試劑盒 forAminomethyltransferase(AMT)
CD320分子(CD320)檢測試劑盒 forClusterOfDifferentiation320(CD320)
著絲粒蛋白F(CENPF)檢測試劑盒 forCentromereProteinF(CENPF)
Ⅲ型膠原(COL3)檢測試劑盒 forCollagenTypeIII(COL3)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移mei1(GALNT1)檢測試劑盒 forPolypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase1(GALNT1)
分泌型磷蛋白2(SPP2)檢測試劑盒 forSecretedPhosphoprotein2(SPP2)
meiⅡ(CA2)檢測試劑盒 forCarbonicAnhydraseII(CA2)
腦鈉su(BNP)檢測試劑盒 forBrainNatriureticPeptide(BNP)
半胱氨suan蛋白mei抑制劑5(CST5)檢測試劑盒 forCystatin5(CST5)
抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)檢測試劑盒 forAnti-TypeIICollagenAntibody(Anti-CIIAb)
干擾suα(IFNα)檢測試劑盒 forInterferonAlpha(IFNa)
端錨聚合mei1(TNKS1)檢測試劑盒 forTankyrase1(TNKS1)
溶血脂?；D移mei1(LPCAT1)檢測試劑盒 forLysophosphatidylcholineAcyltransferase1(LPCAT1)
Annexin V-EGFP細胞凋亡檢測試劑盒硬脂suan聚乙二chun50標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Polyoxyl 50 Stearate
硬脂suan聚乙二chun40標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Polyoxyl 40 Stearate
油suan聚烴氧酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Polyoxyl Oleate
jia基纖維su標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：Methylcellulose (AS)
羥丙基jia基纖維su標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱：
羥丙基纖維su標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Hydroxypropyl Cellulose
乙基纖維su標準品 規(guī)格:1g 英文名稱：Ethylcellulose
葡聚糖1標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Dextran 1
葡聚糖T-10標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Dextran T-10
葡聚糖40標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Dextran 40
操作步驟：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
