Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品：suan性木聚糖mei測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24樣 測(cè)試方法：可見分光光度法
性木聚糖mei測(cè)定試劑盒 規(guī)格：100管/48樣 測(cè)試方法：微量法
性木聚糖mei測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24樣 測(cè)試方法：可見分光光度法
β-木糖mei測(cè)定試劑盒 規(guī)格：100管/48樣 測(cè)試方法：微量法
β-木糖mei測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24
產(chǎn)品介紹:
AlamaBlue 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒提供了一種可靠、靈敏、安全和低成本的快速有效檢測(cè)細(xì)胞活力與毒性的方法。AlamaBlue 通過在細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的化學(xué)還原反應(yīng)，將非熒光信號(hào)的染料轉(zhuǎn)換成為一紅色熒光物質(zhì)，試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），從而檢測(cè)細(xì)胞的存活率。維持細(xì)胞需要還原性環(huán)境而抑制生長(zhǎng)則表現(xiàn)為氧化型環(huán)境。細(xì)胞生長(zhǎng)率相關(guān)的降低可表現(xiàn)為氧化還原指示劑從氧化型（非熒光素、紫色）轉(zhuǎn)為還原型（熒光素、紅色）。該熒光信號(hào)可以用530~560nm 的激發(fā)波激發(fā)，在590nm 處可以獲發(fā)射波，檢測(cè)570 和600nm 的的吸光度值，校正監(jiān)測(cè)值，可以減去相應(yīng)的570nm 和600nm 的背景吸光度值。檢測(cè)所產(chǎn)生的熒光信號(hào)是與樣品中的活細(xì)胞數(shù)成正比的。 AlamaBlue 細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒的靈敏度相似于[3H]胸苷法檢測(cè)細(xì)胞增殖法。根據(jù)不同類型的細(xì)胞，AlamaBlue 可以檢測(cè)到至少40個(gè)細(xì)胞，同時(shí)保證很好的重現(xiàn)性和靈敏度。作為試鹵靈（紫紅、紅色熒光）可以進(jìn)一步被還原為水解化的試鹵靈（無色、無熒光），當(dāng)細(xì)胞數(shù)量增多，所有的刃天青（7-羥基-3-羰基-10-氧化-三氫吩惡嗪）被轉(zhuǎn)換為試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），試劑盒的信號(hào)反而會(huì)發(fā)生衰減。因此，對(duì)于您所用的試劑盒來說，針對(duì)不同的細(xì)胞類型，應(yīng)該調(diào)整您的細(xì)胞數(shù)，做相應(yīng)的優(yōu)化，才能得到更好的結(jié)果。 操作說明 以下操作可用作通用指導(dǎo)建議。考慮不同細(xì)胞類型與培養(yǎng)條件的差異性，有必要根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化您的操作步驟。 1. 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板每孔100μL 培養(yǎng)基飼養(yǎng)細(xì)胞，控制細(xì)胞數(shù)目在40~10000 個(gè)/貼壁細(xì)胞，2000~500000 個(gè)/懸浮細(xì)胞。設(shè)置空培養(yǎng)基做對(duì)照。 2. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培養(yǎng)基中，37 度孵育：24 小時(shí)（比色法讀數(shù)）；5-6 小時(shí)（熒光讀數(shù)）。 3. 檢測(cè)570nm 和600nm 的吸光度，或者用熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā)，590nm 發(fā)射波讀數(shù)。 4. 如果采用比色法檢測(cè)，選擇OD570-OD600 檢測(cè)，如果檢測(cè)熒光信號(hào)，請(qǐng)?jiān)谛Ｕ齇D 值后，先設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，選擇合適您實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞佳濃度。 |
中文名稱：Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
英文名稱：AlamaBlue Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T
貨號(hào)：FS-X9593
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
乙酰轉(zhuǎn)移mei(ChAT)檢測(cè)試劑盒 forCholineAcetyltransferase(ChAT)
顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒 forGranulin(GRN)
肌球蛋白ⅩⅨ(MYO19)檢測(cè)試劑盒 forMyosinXIX(MYO19)
透明質(zhì)suan結(jié)合蛋白1(HABP1)檢測(cè)試劑盒 forHyaluronanBindingProtein1(HABP1)
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)檢測(cè)試劑盒 forThrombomodulin(TM)
半胱氨suan蛋白mei抑制劑1(CST1)檢測(cè)試劑盒 forCystatin1(CST1)
黏病毒耐藥蛋白2(MX2)檢測(cè)試劑盒 forMyxovirusResistance2(MX2)
白介su1δ(FIL1δ)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin1Delta(FIL1d)
IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)檢測(cè)試劑盒 forReceptorIIForTheFcRegionOfImmunoglobulinE(FceRII)
G抗原10(GAGE10)檢測(cè)試劑盒 forGAntigen10(GAGE10)
Neurobeachin蛋白(NBEA)檢測(cè)試劑盒 forNeurobeachin(NBEA)
S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)檢測(cè)試劑盒 forS100CalciumBindingProteinB(S100B)
胰蛋白mei原激活肽(TAP)檢測(cè)試劑盒 forTrypsinogenActivationPeptide(TAP)
S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測(cè)試劑盒 forS100CalciumBindingProteinA7(S100A7)
信號(hào)淋巴細(xì)胞激活分子家族成員7(SLAMF7)檢測(cè)試劑盒 forSignalingLymphocyticActivationMoleculeFamily,Member7(SLAMF7)
互生蛋白α1(SNTα1)檢測(cè)試劑盒 forSyntrophinAlpha1(SNTa1)
骨橋su(OPN)檢測(cè)試劑盒 forOsteopontin(OPN)
Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒酒石suan鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg×4vials 英文名稱：Sodium Tartrate Dihydrate
左美丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Methotrimeprazine
雷特標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Ceforanide
半乳糖chun標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Galactitol
比林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Antipyrine
jia氧芐啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：
力農(nóng)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Amrinone
膽影suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Iodipamide
jia硫咪zuo標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Methimazole
奧沙標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Oxazepam CIV
