羅丹明123染色試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品：β-淀粉mei測試盒 規(guī)格：50管/24樣 測試方法：可見分光光度法
ADPG焦磷suan化mei(AGP）測試盒 規(guī)格：100管/96樣 測試方法：微量法
ADPG焦磷suan化mei(AGP）測試盒 規(guī)格：50管/48樣 測試方法：紫外分光光度法
ADPG焦磷suan化mei(AGP）測試盒 規(guī)格：25管/24樣 測試方法：紫外分光光度法
可溶性淀
中文名稱：羅丹明123染色試劑盒
英文名稱：Cell Apoptosis Detection Kit(Rhodamine 123)
產(chǎn)品規(guī)格：100T
貨號：FS-X9583
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或從組織中提取出的線粒體的膜電位檢測。羅丹明123（Rhodamine 123）是一種可透過細(xì)胞膜的陽離子熒光染料，是一種線粒體跨膜電位的指示劑。它可以快速通過細(xì)胞膜，僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲，并且對細(xì)胞沒有任何毒性。其大激發(fā)波長為507nm，大發(fā)射波長為529nm。在熒光顯微鏡下觀察，呈現(xiàn)黃綠色熒光，也可用熒光光度計或流式細(xì)胞儀檢測，通過熒光信號的強(qiáng)弱來檢測線粒體膜電位的變化和凋亡的發(fā)生。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
組織蛋白meiG自身抗體(Cath G Ab)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Cath G Ab ELISA Kit，Cath G Ab，
周期su依賴性激mei7(CDK-7)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CDK-7 ELISA Kit，CDK-7，
中性粒細(xì)胞性磷suanmei(NAP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NAP ELISA Kit，NAP，
著絲粒蛋白B(CENP-B)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CENP-B ELISA Kit，CENP-B，
游離脂肪suan(FFA)elisa檢測試劑盒 英文名稱：FFA ELISA Kit，F(xiàn)FA，
異鎖鏈su(IDES)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IDES ELISA Kit，IDES，
胰島su受體底物1(IRS1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IRS1 ELISA Kit，IRS1，
UDP半乳糖-4-差向異構(gòu)mei(GALE)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GALE ELISA Kit，GALE，
Sideroflexin2蛋白(SFXN2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SFXN2 ELISA Kit，SFXN2，
TATA盒結(jié)合蛋白(TBP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：TBP ELISA Kit，TBP，
RNA結(jié)合基元蛋白20(RBM20)elisa檢測試劑盒 英文名稱：RBM20 ELISA Kit，RBM20，
Podocin蛋白(PDCN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PDCN ELISA Kit，PDCN，
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖mei(NAGase)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NAGase ELISA Kit，NAGase，
Neuroguidin蛋白(NGDN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NGDN ELISA Kit，NGDN，
Megane蛋白(Mgn)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Mgn ELISA Kit，Mgn，
Janus激mei2(JAK2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：JAK2 ELISA Kit，JAK2，
GTP環(huán)化水解mei1(GCH1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GCH1 ELISA Kit，GCH1，
羅丹明123染色試劑盒鹽suan地美環(huán)su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：
鹽suan金霉su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：
芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:6mg×3vials 英文名稱：
呋辛酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:350mg 英文名稱：Cefuroxime Axetil
鹽suan心得平標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Oxprenolol Hydrochloride
異麥芽tong糖chun標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Isomalt
六jia密an標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Altretamine
托美丁鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Tolmetin Sodium
噻肟鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:350mg 英文名稱：Cefotaxime Sodium
鹽suan替扎尼定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Tizanidine Hydrochloride
