產(chǎn)品介紹:
Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用FITC標(biāo)記了的Annexin V作為探針,來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。 其檢測(cè)原理為:在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲氨suan(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力結(jié)合??赏ㄟ^(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨suan與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。 另外,本試劑盒中還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。PI是一種核酸染料,它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,但可以透過(guò)凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此,將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),PI 則被排除在活細(xì)胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細(xì)胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被FITC 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性(Annexin V+/PI+)。 儲(chǔ)存條件:4℃,有效期一年。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit | 20 rxn | FS-X9620 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
微粒體S轉(zhuǎn)移mei2(MGST2)檢測(cè)試劑盒 forMicrosomalGlutathioneSTransferase2(MGST2)
Slit同源物3(Slit3)檢測(cè)試劑盒 forSlitHomolog3(Slit3)
腱蛋白(CHRD)檢測(cè)試劑盒 forChordin(CHRD)
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)檢測(cè)試劑盒 forChordinLikeProtein2(CHRDL2)
補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)檢測(cè)試劑盒 forComplementFactorHRelatedProtein3(CFHR3)
Intersectin1蛋白(ITSN1)檢測(cè)試劑盒 forIntersectin1(ITSN1)
周期su依賴性激mei8(CDK8)檢測(cè)試劑盒 forCyclinDependentKinase8(CDK8)
激肽釋放mei4(KLK4)檢測(cè)試劑盒 forKallikrein4(KLK4)
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激meiⅡα(CAMK2α)檢測(cè)試劑盒 forCalcium/CalmodulinDependentProteinKinaseIIAlpha(CAMK2a)
心鈉肽(ANP)檢測(cè)試劑盒 forAtrialNatriureticPeptide(ANP)
孤兒su磷suanmei1(PHOSPHO1)檢測(cè)試劑盒 forPhosphatase,Orphan1(PHOSPHO1)
精氨酰基轉(zhuǎn)移mei1(ATE1)檢測(cè)試劑盒 forArginyltransferase1(ATE1)
纖溶mei原(Plg)檢測(cè)試劑盒 forPlasminogen(Plg)
基質(zhì)金屬蛋白mei8(MMP8)檢測(cè)試劑盒 forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)
端粒重復(fù)結(jié)合因子2相互作用蛋白(TERF2IP)檢測(cè)試劑盒 forTelomericRepeatBindingFactor2InteractingProtein(TERF2IP)
熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測(cè)試劑盒 forHeatShockTranscriptionFactor4(HSF4)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)檢測(cè)試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta3(TGFb3)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC/PI)卡維地相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
炔諾tong醋suan酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Norethindrone Acetate
卡巴標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Carbachol
鹽suan卡替爾標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Carteolol Hydrochloride
鹽suanjiafu喹標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Mefloquine Hydrochloride
番瀉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Sennosides
異翅果定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Isopteropodine
氫溴suan后馬托品標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Homatropine Hydrobromide
丙基硫氧嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Propylthiouracil
左旋jia狀腺su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Levothyroxine