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自養(yǎng)無(wú)枝酸菌熒光定量PCR試劑盒探針法

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海邦景實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請(qǐng)退換,有技術(shù)疑問可隨時(shí)給于解答,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。





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產(chǎn)地國(guó)產(chǎn) 加工定制 適用領(lǐng)域科研
貨號(hào)BJ-P9237
自養(yǎng)無(wú)枝酸菌熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產(chǎn)品:馬尿酸鈉培養(yǎng)基 250g5mg 抑制劑 Pepstatin A 4℃保存50T 人免疫缺陷病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存5 mg Carboxy-PTIO (一氧化氮清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0
自養(yǎng)無(wú)枝酸菌熒光定量PCR試劑盒探針法 產(chǎn)品詳情

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號(hào)

自養(yǎng)無(wú)枝酸菌熒光定量PCR試劑盒探針法

Amycolata autotrophica

多種規(guī)格

BJ-P9237

2.jpg

特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg


實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

磷測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))比色法(磷鉬酸法)  100/96樣  Phosphate Assay Kit10mL 抑制劑,10mg/mL Aprotinin Solution -20℃保存

鎂測(cè)試盒比色法  100/96樣  Magnesium Assay Kit1EC-304細(xì)胞株 EC-304 低溫運(yùn)輸和保存

鈣測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))比色法(半自動(dòng)生化儀)  30/25樣  Calcium Assay Kit225ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 10個(gè)/

鉀測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))比濁法(手工)  30/25樣  Potassium Assay Kit500 U 限制性內(nèi)切SacI Restriction Endonuclease -20℃保存

活性氧檢測(cè)試劑盒(ROS)  100T  Reactive Oxygen Species Assay Kit50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),3M   Potassium Acetate Solution,3M   常溫保存

抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測(cè)試盒(比色法)  50T  100mg 遺傳(G418)干粉 G418 Sulfate (Geneticin) Powder 4℃避光保存

過氧化氫酶(CAT)測(cè)試盒 (可見光比色法)  100T  2 ug pProEX-Hta pProEX-Hta 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)全血)  48T  水楊苷發(fā)酵管  20

乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)血清、組織等)  48T  2 ug pCAMBIA1381Z pCAMBIA1381Z 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

乳酸脫氫酶測(cè)試盒(LDH)  24T|48T  25miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒 miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit -20℃保存

ATP酶測(cè)試盒(組織及細(xì)胞膜需高速離心)  50T  1g  -3- 乙酸 IAA -20℃保存

自養(yǎng)無(wú)枝酸菌熒光定量PCR試劑盒探針法 IFNA8 基因全長(zhǎng)ORF克隆犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

ICAM-1 / CD54 基因全長(zhǎng)ORF克隆犬腎上腺素(EPI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

GranzymeB 基因全長(zhǎng)ORF克隆犬神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒*直銷

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SLPI 基因全長(zhǎng)ORF克隆犬軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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SMAC / Diablo 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆犬醛固酮(ALD)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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