操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
DAPI Dying Solution | 10ml | FS-X9647 |
產(chǎn)品介紹:
本產(chǎn)品濃度已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,確??梢詽M足各種常規(guī)染色的需要。如需使用特定濃度的DAPI,請(qǐng)選購(gòu)DAPI(SY0495)或DAPI染液(5mg/ml)(SY0496)。 DAPI,也稱DAPI dihydrochloride,是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。因?yàn)镈API是含有特定AT序列DNA的一種嵌入劑,它能像Hoechst染料一樣粘附在DNA雙螺旋的小溝區(qū)。盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但卻能穿透擾亂的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來(lái)檢測(cè)酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為360nm和460nm。 DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。 :28718-90-3 分子式:C16H17Cl2N5 分子量:350.25 儲(chǔ)存條件:4℃,有效期六個(gè)月 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
補(bǔ)體因子I(CFI)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:CFI ELISA Kit,CFI,
表皮角蛋白(EK)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:EK ELISA Kit,EK,
白三烯D4(LTD4)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:LTD4 ELISA Kit,LTD4,
白介su1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:IL-1sRⅠ ELISA Kit,IL-1sRⅠ,
γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移mei(GGCT)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:GGCT ELISA Kit,GGCT,
β淀粉樣多肽42(Aβ 42)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:Aβ 42 ELISA Kit,Aβ 42,
可溶性蛋白185(sp185/HER-2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:sp185/HER-2 ELISA Kit,sp185/HER-2,
人抗皮膚抗體(ASA)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:ASA ELISA Kit,ASA,
人抗眼肌抗體(EMAb)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:EMAb ELISA Kit,EMAb,
人抗核周因子抗體(APF)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:APF ELISA Kit,APF,
人抗DNAmeiB抗體(anti-DNase B Ab)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:anti-DNase B Ab ELISA Kit,anti-DNase B Ab,
解整合su樣金屬蛋白mei19(ADAM19)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:ADAM19 ELISA Kit,ADAM19,
jia狀腺球蛋白(TG)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:TG ELISA Kit,TG,
基質(zhì)裂解su(ST1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:ST1 ELISA Kit,ST1,
肌酐(Cr)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:Cr ELISA Kit,Cr,
核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:NFκB ELISA Kit,NFκB,
胱天蛋白mei10(P10)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:P10 ELISA Kit,P10,
DAPI染液(即用型)ben妥英相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Phenytoin Related Compound A
si他夫定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Stavudine
替扎尼定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
夫定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:400mg 英文名稱:Zidovudine
鹽suan肼屈嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Hydralazine Hydrochloride
輔mei Q10標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
輔mei Q10環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
輔mei Q10雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
新生霉su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Novobiocin
鹽suan羥嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱: