產(chǎn)品名稱 | RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細胞 | 貨號 | A01X1144 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | RBL2H3:RBL-2H3 |
分類 | 大鼠系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | RBL2H3 |
種屬 | 大鼠 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | 外周血；化學誘變嗜堿性細胞；白血病 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
詳情簡介 | RBL-2H3細胞是1978年國立牙科研究所的免疫學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。RBL-2H3細胞具有高親和力的IgE受體，通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。RBL-2H3細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面，包括細胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長，但??? |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | MEM＋15%FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~50-60小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
別稱公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Ras相關(guān)蛋白RAB-12抗體 英文名；RAB12膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體
RAS相關(guān)蛋白Rab5B單克隆抗體 英文名；RAB5B膠質(zhì)母細胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體
RAS相關(guān)蛋白Rab5B抗體 英文名；RAB5B膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體
RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14單克隆抗體 英文名；RAB14膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體
RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14抗體 英文名；RAB14膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體
RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab35抗體 英文名；RAB35膠質(zhì)纖維酸性蛋白單克隆抗體
RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細胞Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體 英文名；RASSF2膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體
Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 英文名；RASSF3膠質(zhì)纖維酸性蛋白重組兔單克隆抗體
RAS相關(guān)抑細胞生長蛋白1抗體 英文名；DIRAS1膠質(zhì)源性連接蛋白抗體
Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 英文名；KSR1角蛋白82抗體
RAS樣蛋白12抗體 英文名；RASL12角蛋白KRT83抗體
Ras樣蛋白A+B抗體 英文名；RALA+RALB角蛋白相關(guān)蛋白10-2抗體
Ras樣蛋白A抗體 英文名；RALA角蛋白相關(guān)蛋白11-1抗體
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
