參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：蠟樣芽孢桿菌核酸檢測(cè)試劑盒恒溫?zé)晒夥?/strong>
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號(hào)：BJP63511
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
?
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測(cè)樣品與競爭模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測(cè)模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
人口腔癌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2-甲氧基茴香硫Human RASIP1 ELISA
人前列腺正常拉丁屬名: Oceanobacillus kimchiiN-Boc-N'-Cbz-L-賴氨酸Human RASAL2 ELISA
急性淋巴用途: 微生物肥料N-Boc-N'-Cbz-L-賴氨酸Human RASSF4 ELISA
胸膜積液B淋巴注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用N-Boc-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽Human RBBP6 ELISA
人癌拉丁屬名: Aspergillus niger三異叉酮基膦Human RASEF ELISA
人類胚胎干拉丁屬名: Aeromicrobium fastidiosum雙十烷基二甲基溴化銨Human RASGEF1A ELISA
人誘導(dǎo)型多能干拉丁屬名: Bacillus subtilis雙十烷基二甲基溴化銨Human RBBP8 ELISA
脂肪來源人MSC人脂肪間充質(zhì)干注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2-氟-6-三氟甲基芐Human RBBP9 ELISA
人肺腺癌阿霉素耐藥株拉丁屬名: Rhizopus stolonifer2-氟-6-三氟甲基芐Human RBM10 ELISA
人黑色素瘤耐阿霉素株拉丁屬名: Nocardia flavorosea2-氟-6-三氟甲基芐Human RBM14 ELISA
低轉(zhuǎn)移人肝癌拉丁屬名: Flavobacterium frigidimaris2-氟-6-(三氟甲基)溴芐Human RASGRF1 ELISA
人骨髓瘤注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2-氟-6-(三氟甲基)溴芐Human RASGEF1B ELISA
蠟樣芽孢桿菌核酸檢測(cè)試劑盒恒溫?zé)晒夥?/strong>L-組氨酸/(S)-2-氨基-3-(4-咪唑基)酸/L-α-氨基-β-4-咪唑基酸/L-組織氨基酸/α-氨基-1H-咪唑-4-酸/咪唑-5-α-氨酸/L-HistidineLRFN3/SALM4 神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體100 ul
D-組氨酸/D-2-氨基-3-(4-咪唑基)酸/D-組織氨酸/D-甘噁啉-5-閃氨酸/D-甘惡啉-5-氨酸/D-組織氨基酸/D-HistidineLRFN4 富含亮氨酸重復(fù)序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體100 ul
DL-組氨酸/(±)-2-氨基-3-(4-咪唑基)酸/DL-2-氨基-3-(1H-咪唑-4-基)酸/DL-組織氨基酸/DL-HistidineLRRC4B/NGL3 神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體20 ul
DL-組氨酸鹽酸鹽/DL-氫氯組氨酸/DL-α-氨基-β-(4-咪唑基)酸單鹽酸鹽/DL-Histidine HCL H2OLSAMP 大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體100 ul
D-組氨酸鹽酸鹽/D-氫氯組氨酸/D-α-氨基-β-(4-咪唑基)酸單鹽酸鹽/D-Histidine monohydrochloride monohydrateMDGA2 神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體100 ul
L-組氨酸鹽酸鹽/鹽酸組氨酸/L-氫氯組氨酸/L-Histidine HCLMyelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗體20 ul
L-組氨酸鹽酸鹽一水物/鹽酸組氨酸/L-氫氯組氨酸一水物/L-Histidine HCL H2ONCAM2 神經(jīng)粘附分子2抗體100 ul
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
