JC-10熒光探針正在熱銷的產(chǎn)品：CD56/NCAM1 神經(jīng)粘附分子1抗體四丁氫氧化銨 ~40% 水溶液，離子色譜級
CD171/NCAM-L1 神經(jīng)粘附分子配體1抗體2,4,5-三
CD172a/SIRP Alpha 信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體叔戊 97%
CD57 CD57抗體DL-α-酚琥珀酯
CD68 CD68抗體氧鎓四氟鹽 96%
CD68 CD68抗體(硅烷)重氮 2.0M 己
中文名稱：JC-10熒光探針
英文名稱：JC-10
產(chǎn)品規(guī)格：1mg|5mg
貨號：FS-X9742
產(chǎn)品介紹:
JC-10是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-10聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以產(chǎn)生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-10不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時JC-10為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。激發(fā)波長Ex510nm，發(fā)射波長Em525nm。 線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降，同時也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個檢測指標(biāo)。JC-10單體的大激發(fā)波長為515nm，大發(fā)射波長為529nm；JC-10聚合物的大激發(fā)波長為585nm，大發(fā)射波長為590nm。實際觀察時，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。 儲存條件：-20℃干燥避光保存，保質(zhì)期12個月。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
糖蛋白130(gp130/CD130)英文名：gp130/CD130 蛇巴曲抗體包裝5g
瘦受體(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝100ml
瘦受體(LEPR)英文名：LEPR Bax抗體包裝25ml
瘦(LEP/Leptin)英文名：LEP/Leptin Bcl-2抗體包裝500ml
噬性細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體包裝1g
嗜性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 堿性成纖維生長因子抗體包裝250mg
生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)英文名：GROα/CXCL1/MGSA 癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100ml
生長分化因子15(GDF-15)英文名：GDF-15 牛血清白蛋白抗體包裝25ml
神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)英文名：fractalkine/CX3CL1 β-酪蛋白抗體包裝5ml
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)英文名：LOX-1 β葡聚糖受體抗體包裝100g
苗條受體(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor 蛇蛋白巴曲抗體包裝500g
苗條(OB)英文名：OB 非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25mg
苗條(LEP)英文名：LEP 磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25g
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)英文名：GMCSF/CSF2 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝5g
可溶性E選擇(sE-selectin)英文名：sE-selectin BarX1蛋白抗體包裝100g
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體干擾α4(IFNα4)Epirubicin hydrochloride (4'-Epidoxorubicin hydrochloride) 是阿霉的半合成的 L-阿拉伯糖衍生物，能
JC-10熒光探針阪崎腸桿 D-(+)-二苯甲酰囊蟲病抗體
黑曲霉 米那普侖鹽酸鹽腦啡肽
環(huán)狀芽孢桿 富馬酸鈉腦鈉;腦鈉尿肽
Rhizobium multihospitium 酸三環(huán)癸烯酯內(nèi)
釀酒酵母 (R)-1-N-Boc-2-甲基哌內(nèi)核心抗體
附著孢小隔指孢 3-溴-5-苯甲腺來源的血管內(nèi)皮生長因子
綠菇 2,4-二-6-苯基-1,3,5-三內(nèi)皮
雙孢蘑菇 2-氟-3-羥基吡啶內(nèi)皮1
假單胞 2,2'-二烯基雙酚A內(nèi)皮2
嗜中溫寒冷桿 5-乙氧基-3-甲內(nèi)皮特異性分子
焦曲霉 3-[(N-Boc-N-甲氨基)甲基]內(nèi)皮型一氧化氮合
綠色木霉 2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨基酸內(nèi)皮抑
枯草芽孢桿枯草亞種 2--1,3-二甲氧基苯內(nèi)皮脂肪
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 氟鋯酸銨內(nèi)消旋肌單核苷酸脫氫
枯草芽孢桿枯草亞種 7-硝基喹唑啉-2,內(nèi)源性
