一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Hepatitis B Virus(HBV)APCR
貨號:BJ-P6836
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
1g 溶壁干粉 Lywallzyme Powder -20℃干燥保存(3個月以上),或4℃干燥保存(3個月以內(nèi)) 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD3 gamma chain
100次 膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒 DNABACK & PCR Clean-Up Kit 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Pro-neuropeptide Y
3000U RNase抑制劑(小鼠源) Murine RNase Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transmembrane protein 132D
1000支 200 μL RNase-free 黃吸頭(袋裝) 常溫葡萄糖發(fā)酵管進(jìn)口、國產(chǎn)葡萄糖發(fā)酵管20支BR
100µL 小鼠抗CBP標(biāo)簽單抗 Anti CBP-Tag Mouse MAb -20℃保存 7.8-500 pg/mL 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒
2 ug pLLP-STQ pLLP-STQ 低溫運輸,-20℃保存
1次 一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(離心法) One-Step 96 Microwell Plate Colony Plasmid DNAOUT 常溫
25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,4X) Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,4X) 常溫保存 31.2-2000 pg/mL 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒
48 T 肝/肌糖元測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Epidermal growth factor-like protein 7
2 ug pGL4.19 pGL4.19 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 U/mL 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
心浸液瓊脂 Heart Infusion Agar 250g 0.156-10 ng/mL 人磷脂D1 (hPLD1) ELISA試劑盒
乙型肝炎病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒Cell proliferation and toxicity detection kit Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 20次/50次/100次
Tunel cell apoptosis detection kit(FITC) Tunel細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC) 10次/20次/50次
轉(zhuǎn)染試劑 0.75ml/1ml/1.5ml
細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒 50次/200次/500次
高保真KOD試劑盒 50U/200U/1000U
細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒(CCK-8) 100次/500次/3000次/10000次
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1法) 50T|100T
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10法) 100T
Caspase-8 Activity colorimetric assay Kit Caspase-8活性測定試劑盒 20T|50T|100T
Caspase-6 Activity colorimetric assay Kit Caspase-6活性測定試劑盒 20T|50T|100T
Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit Caspase-5活性測定試劑盒 20T|50T|100T