細胞增殖示蹤熒光探針正在熱銷的產品：二氫辣椒含量試劑盒 規(guī)格：100T 測試方法：HPLC
β-胡蘿卜su含量的測試 規(guī)格：100T 測試方法：HPLC
含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
N-乙酰神經(jīng)氨suan（Neu5Ac）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
N-羥乙酰神經(jīng)氨suan（Neu5Gc）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：細胞增殖示蹤熒光探針
英文名稱：CFDA, SE
產品規(guī)格：25mg
貨號：FS-X9641
產品介紹:
CFDA, SE，英文全稱Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞示蹤染料，不僅可用于細胞增殖的體外實驗，還可用于追蹤細胞在體內的分裂增殖過程。 CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內的氨基結合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。 CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。 CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制備儲存液后再使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
環(huán)胍氨suan肽(CCP)檢測試劑盒 forCyclicalCitrullinatedPeptide(CCP)
凋亡相關因子(FAS)檢測試劑盒 forFactorRelatedApoptosis(FAS)
腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測試劑盒 forBrainDerivedNeurotrophicFactor(BDNF)
胎兒血紅蛋白(HBF)檢測試劑盒 forFetalHemoglobin(HBF)
白介su7受體(IL7R)檢測試劑盒 forInterleukin7Receptor(IL7R)
Toll樣受體6(TLR6)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor6(TLR6)
絲氨suan/蘇氨suan激mei24(STK24)檢測試劑盒 forSerine/ThreonineKinase24(STK24)
分泌性白細胞蛋白mei抑制因子(SLPI)檢測試劑盒 forSecretoryLeukocytePeptidaseInhibitor(SLPI)
表皮生長因子途徑底物蛋白3(EPN3)檢測試劑盒 forEpsin3(EPN3)
血管生成su1(ANGPT1)檢測試劑盒 forAngiopoietin1(ANGPT1)
泛chun細胞色suC還原mei核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)檢測試劑盒 forUbiquinolCytochromeCReductaseCoreProteinI(UQCRC1)
細胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)檢測試劑盒 forProgrammedCellDeathProtein5(PDCD5)
二肽基肽mei9(DPP9)檢測試劑盒 forDipeptidylPeptidase9(DPP9)
癌胚抗原相關細胞粘附分子7(CEACAM7)檢測試劑盒 forCarcinoembryonicAntigenRelatedCellAdhesionMolecule7(CEACAM7)
白介su28A(IL28A)檢測試劑盒 forInterleukin28A(IL28A)
尿二磷suan糖基轉移mei8(UGT8)檢測試劑盒 forUDPGlycosyltransferase8(UGT8)
jia狀旁腺su受體2(PTHR2)檢測試劑盒 forParathyroidHormoneReceptor2(PTHR2)
細胞增殖示蹤熒光探針沙平相關物質A標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱：Loxapine Related Compound A
鈣標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Atorvastatin Calcium
鹽suan醋丁爾標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Acebutolol Hydrochloride
帕拉金糖標準品 規(guī)格:5g 英文名稱：Isomaltulose
鹽suan普羅帕tong標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Propafenone Hydrochloride
膦jiasuan鈉標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱：Foscarnet Sodium
匹伐lv可托龍標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Clocortolone Pivalate
拉西坦外消旋混合物標準品 規(guī)格:15mg 英文名稱：Levetiracetam Racemic Mixture
乙suan異fu潑尼龍標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Isoflupredone Acetate
尿suan二鈉標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Disodium 5-Uridylate
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
