產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱(chēng) | CoC1人卵巢癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X689 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | CoC1:CoC1 |
分類(lèi) | 人系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱(chēng) | COC1 |
組織來(lái)源 | 卵巢 |
生長(zhǎng)特性 | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | COC1細(xì)胞是由熊世鋼等人于1993年建系的一株細(xì)胞系；細(xì)胞于原代培養(yǎng)至第17天傳代，以后反復(fù)傳代，生物學(xué)特性穩(wěn)定。COC1細(xì)胞可表達(dá)多種腫瘤標(biāo)志物和野生型p53蛋白、突變型p53蛋白；COC1細(xì)胞裸鼠接種可產(chǎn)生分化差的腺癌。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:3 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
致瘤性 | Yes, forms tumors in nude mice. |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿(mǎn) 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
蘇云金芽胞桿菌九州亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kyushuensis 金耳、黃木耳
拉曼被孢霉 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
雞腿蘑（毛頭鬼傘） 黃色長(zhǎng)孢鏈霉菌
棲土曲霉 吸水鏈霉菌 對(duì)防治水稻紋枯病有效
類(lèi)紅紅細(xì)菌 吸水鏈霉菌
斯氏油脂酵母 印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
酵母 黑球漆斑菌
乙型副傷寒沙門(mén)菌凍干粉 蟲(chóng)草
CoC1人卵巢癌細(xì)胞硝基還原假單胞菌 Azospirillum brasilense巴西固氮螺菌
香港洛克氏菌 Azotobacter beijgerinckii拜氏固氮菌
雙歧雙歧桿菌 德氏乳桿菌保加利亞亞種
糞腸球菌凍干粉 蔥頭伯克氏菌
異型酒香酵母 韓國(guó)叢毛單胞菌
洋蔥伯克霍爾德氏菌 變形桿菌
尿素八疊球菌 黑化鏈霉菌
噬糖鹽紅菌 蝕脈鐮孢霉
梭菌 米黑根毛霉
魯氏酵母 金耳、黃木耳
中華根霉 緩沖蛋白胨水90ml/瓶
寄生曲霉 脆弱擬桿菌
