細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔進(jìn)行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開(kāi)闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器;移液器置于右前方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸??;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無(wú)菌操作
人眼脈絡(luò)黑色瘤細(xì)胞; c918 (STR)
英文名稱 | c918:c918 | 貨號(hào) | AXB9930 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
分類 | 人細(xì)胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
商品介紹:
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 不詳 |
組織來(lái)源 | 未知 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 多角形 |
詳情介紹 | STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),三株人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞C918、M619和Mum-2B為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:
一、概念不同
1、細(xì)胞株:細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(Cell Strain)。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞系(cell line)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
二、形成方法不同
1、細(xì)胞株:通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī),原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細(xì)胞系。
三、細(xì)胞的延續(xù)性不同
1、細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
交叉污染的確認(rèn)
為細(xì)胞換液時(shí),要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細(xì)胞中,以免損傷細(xì)胞,當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。
使用無(wú)菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí),每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
細(xì)胞傳代的時(shí)間把握
當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖,貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒(méi)有擴(kuò)增空間,或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過(guò)培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力,無(wú)法進(jìn)一步生長(zhǎng)時(shí),細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平,以便細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng),并且刺激進(jìn)一步增殖,必須對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代。
細(xì)胞培養(yǎng)的步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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Alpha2-AP(Mouse Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 小鼠α2抗纖溶酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-CENP-A (Ser7)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化著絲粒蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
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C2orf88 英文名稱: 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框88抗體 0.2ml
Anti-Phospho-CENP-A (Ser7)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化著絲粒蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶IIMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
人眼脈絡(luò)黑色瘤細(xì)胞; c918 (STR)Anti-CPT1A/FITC 熒光素標(biāo)記抗肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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AACT/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記胰 0.1ml
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嘔吐毒素單克隆抗體 小鼠單抗 5
Anti-CPT1A/FITC 熒光素標(biāo)記抗肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml