一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:緊密著色霉PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Fonsecaea compactaPCR
貨號:BJ-P6760
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
2 ug pIRES-neo3 pIRES-neo3 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人硫代嗎啉羧化物脫氫(CRYM) ELISA試劑盒
5mg 熒光素(FITC) 標(biāo)記親和素 FITC-Avidin -20℃保存
溴化十六烷基胺瓊脂 Cetrimide Agar Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Interleukin-36 alpha
2 ug pET-30c(+) pET-30c(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.06-4 pmol/L ELISA Kit for Human Thymidine kinase, cytosolic
1000U Thrombin -70℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Transcription factor SOX-9
10000U MMLV逆轉(zhuǎn)錄 MMLV Reverse Transcriptase -20℃保存 0.312-20 ng/mL 血小板活化因子(Platelet-activating factor)ELISA試劑盒
25g L- 半 L- Cysteine 室溫干燥保存NBB瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)NBB Agar250克啤酒中厭氧菌檢測
1瓶 A2780株 A2780 低溫運輸和保存 1.56-100 ng/mL 人MFSD2A ELISA試劑盒
5g D- 核糖 D-Ribose 4℃保存 0.78-50 ng/mL 人過氧化還原5(PRDX5)ELISA試劑盒
2 ug pIE1-neo pIE1-neo 低溫運輸,-20℃保存
50mL RIPA Buffer,5X RIPA Buffer,5X 常溫保存 0.312-20 ng/mL β羥丁酸(beta-Hydroxybutyric acid)ELISA試劑盒
緊密著色霉PCR熒光定量檢測試劑盒構(gòu)樹堿A標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C24H45NO10 登錄號: 173220-07-0 分子量: 507 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色晶體 規(guī)格: 20 mg/支
麻楓樹酚酮B標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C20H24O2 登錄號: 71386-38-4 分子量: 296 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 淡黃色固體 規(guī)格: 20 mg/支
辛辣內(nèi)酯A標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C30H36O7 登錄號: 130430-97-6 分子量: 508 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色晶體 規(guī)格: 20 mg/支
多被銀蓮花皂苷R8標(biāo)準(zhǔn)品登錄號: 124961-61-1 英文名: Raddeanoside R8 分子式: C65H106O30 分子量: 1367 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色晶體
23-乙酰澤瀉醇C標(biāo)準(zhǔn)品登錄號: 26575-93-9 英文名: 23-Acetyl alisol C 分子式: C32H48O6 分子量: 528.73 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色晶體
木通苯乙醇苷B標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: beta-D-Glucopyranoside, 2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethyl, 6-[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propenoate]; (E)-beta-D-Glucopyranoside, 2-(3,4-Dihydroxyphenyl)ethyl, 6-[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propenoate] 英文名: Calceolarioside B 登錄號: 105471-98-5 分子式: C23H26O11 分子量: 478.45 分子結(jié)構(gòu):
甲基麥冬高黃酮A標(biāo)準(zhǔn)品登錄號: 74805-90-6 英文名: methylophiopogononeA 分子式: C19H16O6 分子量: 340.33 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 淡黃色
麥冬皂苷O-4標(biāo)準(zhǔn)品登錄號: 新品待定 英文名: glycoside O-4 分子式: C39H62O15S 分子量: 802.97 分子結(jié)構(gòu): 外觀: 白色粉末
14α-羥基Sprengerinin C標(biāo)準(zhǔn)品英文別名: 14α-hydroxyldiosgenin-3-O-α-L-rhamnosyl-(1→2)-β-D-xylosyl(1→4)]-β-D-glucoside 英文名: 14α-hydroxy Sprengerinin C 登錄號: 1111088-89-1 分子式: C44H70O17 分子量: 870.02 分子結(jié)構(gòu):