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Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

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  • 更新時(shí)間2022-05-09
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貨號FS-X9559
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:脫氫抗壞血suan還原mei(DHAR)活性測試盒 規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
脫氫抗壞血suan還原mei(DHAR)活性測試盒 規(guī)格:50管/48樣 測試方法:紫外分光光度法
硝suan還原mei(NR)測試盒 規(guī)格:100管/48樣 測試方法:微量法
硝suan還原mei(NR)測試盒 規(guī)格:5
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit

10T|20T|50T|100T

FS-X9559

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨suan(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨suan(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨suan有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨suan與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素(EGFP、FITC)標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。與FITC 的綠色熒光信號相比,EGFP 的綠色熒光信號具有信號強(qiáng),不易淬滅,穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn),故本試劑盒采用EGFP作為熒光標(biāo)記探針。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但對凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來。

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

脂聯(lián)su(human adiponectin)elisa檢測試劑盒  英文名稱:human adiponectin ELISA Kit,human adiponectin,

巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa檢測試劑盒  英文名稱:MCP-1/CCL2 ELISA Kit,MCP-1/CCL2,

白細(xì)胞介su15(IL-15)elisa檢測試劑盒  英文名稱:IL-15 ELISA Kit,IL-15,

組蛋白脫乙酰基mei8(HDAC8)elisa檢測試劑盒  英文名稱:HDAC8 ELISA Kit,HDAC8,

干擾su誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa檢測試劑盒  英文名稱:ITAC/CXCL11 ELISA Kit,ITAC/CXCL11,

非神經(jīng)元性烯chun化mei(NNE)elisa檢測試劑盒  英文名稱:NNE ELISA Kit,NNE,

鈣激活中性蛋白mei6(CAPN6)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CAPN6 ELISA Kit,CAPN6,

對氨基benjiasuan(PABA)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PABA ELISA Kit,PABA,

登革熱抗體(DF-Ab)elisa檢測試劑盒  英文名稱:DF-Ab ELISA Kit,DF-Ab,

suan甘油酯(PC/CPG)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PC/CPG ELISA Kit,PC/CPG,

jia狀腺su(TSH)elisa檢測試劑盒  英文名稱:TSH ELISA Kit,TSH,

層粘連蛋白β1(LN-β1)elisa檢測試劑盒  英文名稱:LN-β1 ELISA Kit,LN-β1,

(MGO)elisa檢測試劑盒  英文名稱:MGO ELISA Kit,MGO,

白細(xì)胞調(diào)節(jié)su(LR)elisa檢測試劑盒  英文名稱:LR ELISA Kit,LR,

白介su23(IL-23)elisa檢測試劑盒  英文名稱:IL-23 ELISA Kit,IL-23,

磷脂meiA2(PL-A2)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PL-A2 ELISA Kit,PL-A2,

可溶性瘦su受體(sLR)elisa檢測試劑盒  英文名稱:sLR ELISA Kit,sLR,
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒si可巴比標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Secobarbital CII

suan標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1.5ml×3ampules  英文名稱:Phosphoric Acid (AS)

雙丙戊suan鈉標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Divalproex Sodium

溴化標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1g  英文名稱:Sodium Bromide

lv化鈉標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1g  英文名稱:Sodium Chloride (AS)

L-阿拉伯糖chun標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:500mg  英文名稱:L-Arabinitol

fujia睪tong標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Fluoxymesterone CIII

羥考tong標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Oxycodone CII

tong標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:500mg  英文名稱:Oxymorphone CII

jia氧fu烷標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1ml  英文名稱:Methoxyflurane

操作步驟:

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。


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