JC-1熒光探針正在熱銷的產(chǎn)品：維生suB5（VB5）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
環(huán)磷suan腺（cAMP）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
環(huán)磷suan鳥（cGMP）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
（ENX）含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色譜法
表兒茶su含量測試盒 規(guī)格：100T 測試方法：高效液相色
中文名稱：JC-1熒光探針
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：1mg
貨號：FS-X9636
產(chǎn)品介紹:
JC-1 用于檢測細胞的線粒體膜電位時常用的濃度范圍為 1～20 μg/ml，對于很多細胞適宜采用的 JC-1濃度為 10 μg/ml。 JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。觀察時，只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。 ：3520-43-2 分子式：C25H27Cl4IN4 分子量：652.23 儲存條件：-20℃，干燥避光，有效期一年 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蛋白激meiCθ(PKCθ)檢測試劑盒 forProteinKinaseCTheta(PKCq)
神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測試劑盒 forNeurotrophin3(NT3)
Vav1癌基因(VAV1)檢測試劑盒 forVav1Oncogene(VAV1)
甘露糖結(jié)合凝集su2(LMAN2)檢測試劑盒 forLectin,MannoseBinding2(LMAN2)
重肽鐵蛋白(FTH)檢測試劑盒 forFerritin,HeavyPolypeptide(FTH)
細胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)檢測試劑盒 forCytokeratinFragmentAntigen21-1(CYFRA21-1)
血小板親和蛋白1(PKP1)檢測試劑盒 forPlakophilin1(PKP1)
骨成型蛋白10(BMP10)檢測試劑盒 forBoneMorphogeneticProtein10(BMP10)
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒 forCollagenTypeIAlpha2(COL1a2)
低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒 forLowDensityLipoprotein(LDL)
組織金屬蛋白mei抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒 forTissueInhibitorsOfMetalloproteinase1(TIMP1)
防御suβ116(DEFβ116)檢測試劑盒 forDefensinBeta116(DEFb116)
利鉀尿肽(KP)檢測試劑盒 forKaliureticPeptide(KP)
su(ANLN)檢測試劑盒 forAnillin(ANLN)
基質(zhì)金屬蛋白mei13(MMP13)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase13(MMP13)
分層蛋白(SFN)檢測試劑盒 forStratifin(SFN)
肝X受體α(LXRα)檢測試劑盒 forLiverXReceptorAlpha(LXRa)
JC-1熒光探針去羥mi松標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Desoximetasone
鹽suan三乙烯四an標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Trientine Hydrochloride
舒林suan標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Sulindac
哌西他嗪標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱：Piperacetazine
羥萘芐芬寧標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Bephenium Hydroxynaphthoate
鹽suan鹽標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：
lv雷他定相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:15mg 英文名稱：
ben咪丁tong標準品 規(guī)格:400mg 英文名稱：Climbazole
炔雌chun相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
酒石suan標準品 規(guī)格:150mg 英文名稱：
