產(chǎn)品介紹:
本試劑盒是一種通過化學發(fā)光法測定細胞內(nèi)ATP含量從而來定量檢測活細胞數(shù)目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與Promega公司的同類產(chǎn)品基本相同,對于相同的細胞樣品本試劑盒的發(fā)光效果更強一些。 本試劑盒比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的檢測試劑與培養(yǎng)細胞等體積混合,反應(yīng)10分鐘后即可進行化學發(fā)光檢測。無需洗滌細胞,也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學發(fā)光非常穩(wěn)定,在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)無顯著變化,30分鐘內(nèi)的下降不超過10%。 本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測,也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測。 本試劑盒線性范圍廣,檢測靈敏度高。用96孔板進行檢測時,本試劑盒在0-50,000個細胞/孔的細胞密度范圍內(nèi)有良好的檢測效果,并且在僅有幾百個細胞時仍有良好的線性關(guān)系。當細胞數(shù)量僅為50個/孔時,發(fā)光強度可達空白孔的5倍左右。 ATP,作為重要的能量分子,在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標,也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子,并和活細胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此,ATP含量能很好地反應(yīng)活細胞的數(shù)目,即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數(shù)或檢測細胞活力。 本試劑盒通過ATP檢測細胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng),ATP可以通過測定化學發(fā)光來進行定量。由于ATP含量能很好地反映活細胞的數(shù)目,而ATP含量和發(fā)光強度成正比,這樣就可以簡單地通過化學發(fā)光強度來計算出細胞活力或細胞數(shù)目。 細胞活力檢測試劑盒(化學發(fā)光法)檢測ATP的原理圖 對于96孔板,我們推薦使用100μl細胞培養(yǎng)液和100μl的檢測試劑,總體積為200μl,此時本試劑盒可以進行100次檢測。對于384孔板,我們推薦使用25μl細胞培養(yǎng)液和25μl的檢測試劑,總體積為50μl,此時本試劑盒可以進行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進行檢測,但細胞培養(yǎng)液和檢測試劑體積的比例必須為1:1。 儲存條件:室溫,有效期2年。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Luminescent Cell Viability Assay Kit | 100次|500次 | FS-X9555 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
角蛋白1(KRT1)檢測試劑盒 forKeratin1(KRT1)
低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒 forLowDensityLipoprotein(LDL)
腦啡肽(ENK)檢測試劑盒 forEnkephalin(ENK)
髓過氧化物mei(MPO)檢測試劑盒 forMyeloperoxidase(MPO)
雙特異性磷suanmei1(DUSP1)檢測試劑盒 forDualSpecificityPhosphatase1(DUSP1)
胃泌su抑制肽(GIP)檢測試劑盒 forGastricInhibitoryPolypeptide(GIP)
外生骨疣蛋白1(EXT1)檢測試劑盒 forExostoses1(EXT1)
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta1(TGFb1)
半乳凝su8(GAL8)檢測試劑盒 forGalectin8(GAL8)
野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)檢測試劑盒 forAgoutiRelatedProtein(AGRP)
SHC-轉(zhuǎn)化蛋白3(SHC3)檢測試劑盒 forSHC-TransformingProtein3(SHC3)
Kruppel樣因子4(KLF4)檢測試劑盒 forKruppelLikeFactor4,Gut(KLF4)
貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測試劑盒 forCatEyeSyndromeChromosomeRegion,Candidate1(CECR1)
軸突蛋白2(NRXN2)檢測試劑盒 forNeurexin2(NRXN2)
Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測試劑盒 forCrossLinkedC-TelopeptideOfTypeIIICollagen(CTXIII)
間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒 forConnexin43(CX43)
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta1(TGFb1)
細胞活力檢測試劑盒(化學發(fā)光法)標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Milrinone
jia溴菲寧標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Mebrofenin
愈創(chuàng)木酚磺suan鉀標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Potassium Guaiacolsulfonate
標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Aztreonam
磺anjia基嘧啶標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Sulfamerazine
奎寧suan標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Quinic Acid
檸檬suan三丁酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Tributyl Citrate
檸檬suan三乙酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Triethyl Citrate
檸檬suan標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Citric Acid
lv化鎂標準品 規(guī)格:1g 英文名稱:Magnesium Chloride (AS)