細胞名稱 人食管癌細胞;NEC培養(yǎng)
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 郭永軍等建系;甲基芐(NMB2A)誘發(fā)人胎兒食管鱗癌第14代裸小鼠移植瘤組織小塊,培養(yǎng)3年,已傳40余代,上皮樣多邊細胞,貼壁生長,裸小鼠移植成功。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人食管癌細胞;NEC培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人食管癌細胞;NEC培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人食管癌細胞;NEC培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
ATL1 Others Human 人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
BRL 3A, 大鼠肝正常細胞
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
CHO細胞,中國倉鼠卵巢細胞 人大細胞肺癌細胞,NCI-H460細胞 CL-0412PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T
HRG Others Human 人 HPRG / HRG 人細胞裂解液 (陽性對照)
b16 小鼠黑色素瘤細胞
CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 )
人細胞;C-33A 大鼠主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人腦瘤細胞;SF767
TIE1 Others Human 人 Tie1 人細胞裂解液 (陽性對照)
黑化大家鼠肺成纖維細胞;NRm
人心臟微血管內(nèi)皮細胞 (HCMEC)( 5×105 )
CL-0027AsPC-1(人胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠紅白血病細胞;MEL 小鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠主動脈平滑肌細胞 Rattus
SDC1 Others Mouse 小鼠 SDC1 / Syndecan-1 / SYND1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照)
賴酸脫羧酶培養(yǎng)基5g生化培養(yǎng)基,賴酸脫羧酶試驗(GB、SN標準)
Drosophilamedium
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 LMG Agar 250 用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(shù)(SN/T1059.2)
LS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaLS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)
含225mlFB1增菌液均質(zhì)袋 10個/包 用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN 標準)
脆弱擬桿菌活化培養(yǎng)基肉湯250g用于脆弱擬桿菌活化培養(yǎng)
110mg/l丙酮酸鈉,不含*" 12800-017 10*1L 110mg/l丙酮酸鈉,不含*" 12800-017 10*1L
*金黃亞種 面包酵母 支/瓶
*卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm)用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(shù)
微生物限度檢查培養(yǎng)基
人食管癌細胞;NEC培養(yǎng)有機磷細菌培養(yǎng)基250g用于測定磷細菌肥料中磷細菌分解有機磷的的效能
Lysine Iron Agar incubation media Lysine Iron Agar
白色葡萄球菌 支/瓶
含225ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋用于菌落總數(shù),大腸菌群,金葡菌,大腸桿菌樣品制備
乳糖膽鹽培養(yǎng)基 250g 用于化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標準)