EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0186PIEC(豬髖動脈內皮細胞 )5×106cells/瓶×2
人臍靜脈內皮細胞裂解物HUVECL
小耳豬腎細胞;SEPfk 癌細胞,MDA-MB-468細胞 WK256細胞,大鼠肉瘤細胞
SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
rCSC, 大鼠心肌細胞 Rattus
CM-H056人卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠垂體細胞(RPC)(1×106)
小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469] 小鼠子宮內膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0186PIEC(豬髖動脈內皮細胞 )5×106cells/瓶×2
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈內皮細胞裂解物HUVECL
小耳豬腎細胞;SEPfk 癌細胞,MDA-MB-468細胞 WK256細胞,大鼠肉瘤細胞
SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物酶標記胰島素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit IgG 兔IgG(親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg
高遷移率族蛋白A1抗體 Anti-HMGA1 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG 小鼠抗羊IgG 1mg
FIS1 英文名稱: 線粒體裂變1蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Ret (Tyr905) 磷酸化指狀蛋白RET抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit IgG 兔IgG(親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg
IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Acetyl CoA Carboxylase 乙酰輔酶A羧化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN2A/P16 (Ser140) 磷酸化抑癌基因p16抗體 規(guī)格 0.1ml
人血清IgM液體(70-80%) 10mg 國產(chǎn)
Wnt receptor 英文名稱: Wnt信號受體蛋白抗體 0.1ml
phospho-DDX58 (Thr170) 英文名稱: 磷酸化DDX58抗體 0.1ml
Anti-Acetyl CoA Carboxylase 乙酰輔酶A羧化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922培養(yǎng)STAT3 英文名稱: 信號轉導和轉錄激活因子3抗體 0.1ml
EDIL3 英文名稱: 表皮生長因子樣重復折疊1結構域蛋白3抗體 0.2ml
嗜中性粒細胞抗原CD177抗體 Anti-CD177/NB1 0.1ml
Anti-VDAC/FITC 熒光素標記電壓依賴性陰離子通道抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 規(guī)格 0.1ml
CD46/MCP(membrane cofactor protein)rat, mouse 膜輔蛋白/內源性輔助因子活性蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922培養(yǎng)質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。