雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞株由陳松森教授實驗室建立;雙位點Cys151和Cys183突變的c-Kit基因轉(zhuǎn)染293ET細胞,篩選獲得。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;IL-3 or rhGM-CSF
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2
人心肌細胞-裂解物HCM-a L
家豬皮膚細胞;SSC-S1 癌細胞,ZR-75-1細胞 NS1細胞,小鼠骨髓瘤細胞
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 Mouse
CM-R016大鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基100mL
人肝間充質(zhì)干細胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)
綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人上皮細胞;Ca Ski
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-裂解物HCM-a L
家豬皮膚細胞;SSC-S1 癌細胞,ZR-75-1細胞 NS1細胞,小鼠骨髓瘤細胞
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
肝細胞生長因子受體抗體 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名稱: 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PILR beta 細胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HPV18 E6 人類狀瘤病毒18抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
WNT7A 英文名稱: 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml
Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7培養(yǎng)phospho-SHC (Tyr427) 英文名稱: 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
EBNA 3B 英文名稱: EB病毒核抗原-3B抗體 0.2ml
CD40L抗體 Anti-CD40L 0.1ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml
Cdc34 peptide 細胞周期調(diào)控因子34抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。