人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
細(xì)胞名稱 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞,通過(guò)導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2,Psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA317,后將PA317產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有*抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細(xì)胞來(lái)源于單克隆。PCR檢測(cè)證實(shí)HK-2細(xì)胞基因組中含有E6/E7基因。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:4傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:9;D16S539:11,12;D18S51:12;D19S433:15,15.2;D21S11:28,30;D2S1338:17,25;D3S1358:16,17;D5S818:12;D7S820:10,11;D8S1179:10,14;FGA:20,22;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17,18;
同工酶
染色體 57~60
使用權(quán)限 A類
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
CLEC2D Others Rat 大鼠 CLEC2D / OCIL 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-00086T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
滑膜細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SGS
PA-1細(xì)胞,人卵巢畸胎瘤細(xì)胞 Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎,HEK-293細(xì)胞 心肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1
S100B Others Human 人 S100B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
DH82 狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞
CL-0390NCI-H1703(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人食道上皮細(xì)胞(HEEC)(5×105 )
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19
KLK4 Others Human 人 KLK-4 / Kallikrein-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-00086T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CLEC2D Others Rat 大鼠 CLEC2D / OCIL 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
滑膜細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SGS
PA-1細(xì)胞,人卵巢畸胎瘤細(xì)胞 Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎,HEK-293細(xì)胞 心肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1
S100B Others Human 人 S100B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Anti-RGS5 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性腸肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 Anti-MAG-a/L-MAG 0.1ml
SOD3 英文名稱: 超氧化物歧化酶3抗體 0.1ml
FOX C2 英文名稱: 叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子C2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKA beta(Ser338) 磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 規(guī)格 0.1ml
VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性腸肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
GABAB1(GABAb Receptor 1) g-氨基丁酸B1受體(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CEACAM1 CEACAM1 / CD66a 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363) 磷酸化D型受體抗體 規(guī)格 0.1ml
PVDF膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF268 英文名稱: 鋅指脂蛋白-1c抗體 0.1ml
DAPP1 英文名稱: B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體 0.2ml
CEACAM1 CEACAM1 / CD66a 鼠單抗 (PE) Human
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2品牌ZBTB4 英文名稱: 鋅指蛋白903抗體 0.2ml
Dscam 英文名稱: 唐氏綜合征細(xì)胞粘附分子抗體 0.2ml
血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體 Anti-AT2R 0.1ml
Anti-ZNF268(1c)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1c抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。