產(chǎn)品名稱:Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞保存
英文名稱:Hepa1-6mouse hepatoma cell line
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0111
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞保存的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞保存培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
分子式: C47H51NO14 853.91 20mg
三尖杉寧堿 英文名稱: Cephalomannine : 71610-00-9 分子式: C45H53NO14 831.9 20mg
10-脫乙?;涂ǘII 英文名稱: 10-Deacetylbaccatin III : 32981-86-5 分子式: C29H36O10 544.59 20mg
多烯* 英文名稱: Docetaxel : 114977-28-5 分子式: C43H53NO14 807.88 20mg
7-表* 英文名稱: 7-Epitaxol : 105454-04-4 分子式: C47H51NO14 853.913 20mg
7-表-10-去乙酰基*(95%) 英文名稱: Deacetyltaxol;10-Deacetyltaxol : 78432-77-6 分子式: C45H49NO13 811.87 20mg
D(+)-半乳糖 英文名稱: D-Galactose : 59-23-4 分子式: C6H12O6 180.16 20mg
* 英文名稱: D(+)-Glucose : 50-99-7 分子式: C6H12O6 180.16 100mg
棉籽糖 英文名稱: D(+)-Raffinose pentahydrate : 17629-30-0 分子式: C18H42O21 594.51 20mg
3,6’-二芥子酰基蔗糖(90%) 英文名稱: 3,′6-d isinapoyl sucrose : 分子式: C36H46O17 "754
" 20mg
蔗糖 英文名稱: Sucrose : 57-50-1 分子式: C12H22O11 342.3 100mg
耐斯糖 英文名稱: Nystose : 13133-07-8 分子式: C24H42O21 666.58 20mg
苦杏仁苷 英文名稱: Amygdalin : 29883-15-6 分子式: C20H27 457.43 20mg
扁桃酸 英文名稱: Mandelic acid : 611-71-2 分子式: C8H8O3 152.15 20mg
長春新堿 英文名稱: Vincristine : 57-22-7 分子式: C46H56N4O10 824.96 20mg
長春花堿 英文名稱: Vinblastine : 865-21-4 分子式: C46H58N4O9 810.97 20mg
長春質(zhì)堿 英文名稱: Catharanthine : 2468-21-5 分子式: C21H24N2O2 336.43 20mg
文多靈 英文名稱: Vindoline : 2182-14-1 分子式: C25H32N2O6 456.53 20mg
長春瑞濱 英文名稱: VINORELBINE : 71486-22-1 分子式: "C45H54N4O8
" 778.94 20mg
長春胺 英文名稱: Vincamine : "1617-90-9
" 分子式: "C21H26N2O3
" 354.44 20mg
* 英文名稱: Vinpocetine : 42971-09-5 分子式: C22H26N2O2 350.46 20mg
川續(xù)斷皂苷乙 英文名稱: Dipsacoside B : 33289-85-9 分子式: C53H86O22 1075.24 20mg
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞保存川續(xù)斷皂苷Ⅵ 英文名稱: Akebia saponin D : 39524-08-8 分子式: C47H76O18 929.099 20mg
* 英文名稱: Hesperidin : 520-26-3 分子式: C28H34O15 610.56 20mg
橙皮素 英文名稱: "Hesperetin
" : 520-33-2 分子式: C16H14O6 302.28 20mg
橘皮素 英文名稱: Tangeretin : 481-53-8 分子式: C20H20O7 372.37 20mg
甲基*(95%) 英文名稱: Methyl hesperidin : 11013-97-1 分子式: C29H36O15 624.59