產(chǎn)品名稱:小鼠角膜內皮細胞*培養(yǎng)基運輸
英文名稱:Murine corneal endothelial cells culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0527
小鼠角膜內皮細胞*培養(yǎng)基運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
小鼠角膜內皮細胞*培養(yǎng)基運輸收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
芫花 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121062-200602 規(guī)格: 20mg/支
槐花 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121063-200702 規(guī)格: 20mg/支
羚羊角 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121064-0301 規(guī)格: 20mg/支
川牛膝 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121065-201004 規(guī)格: 20mg/支
牛膝 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121066-200504 規(guī)格: 20mg/支
蘇木 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121067-200604 規(guī)格: 20mg/支
杜仲葉 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121068-9901 規(guī)格: 20mg/支
忍冬藤 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121069-201004 規(guī)格: 20mg/支
知母 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121070-200804 規(guī)格: 20mg/支
狗脊 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121071-200903 規(guī)格: 20mg/支
枸杞子 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121072-201007 規(guī)格: 20mg/支
胡黃連 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121073-200602 規(guī)格: 20mg/支
萊菔子 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121074-200402 規(guī)格: 20mg/支
桑寄生 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121075-200402 規(guī)格: 20mg/支
救必應 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121076-200602 規(guī)格: 20mg/支
積雪草 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121077-200602 規(guī)格: 20mg/支
小鼠角膜內皮細胞*培養(yǎng)基運輸五倍子 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121078-200402 規(guī)格: 20mg/支
辛夷(望春花) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121079-200403 規(guī)格: 20mg/支
阿魏 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121080- 規(guī)格: 20mg/支
澤瀉 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121081-200603 規(guī)格: 20mg/支
* 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121082-201004 規(guī)格: 20mg/支
棉花根 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121083-9901 規(guī)格: 20mg/支
藏菖蒲 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121084-201003 規(guī)格: 20mg/支
芫花條 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121085-9901 規(guī)格: 20mg/支
雞蛋花 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121086-200602 規(guī)格: 20mg/支
地骨皮(枸杞) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121087-200603 規(guī)格: 20mg/支