產(chǎn)品名稱(chēng)：AGS人胃腺癌細(xì)胞操作方法
英文名稱(chēng)：AGShuman gastric cancer cells
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0098
AGS人胃腺癌細(xì)胞操作方法的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
AGS人胃腺癌細(xì)胞操作方法培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

C15H20O6    296.32    10mg
絡(luò)塞定    英文名稱(chēng)：    Rosiridin    :    100462-37-1    分子式：    C16H28O7    332.39    10mg
絡(luò)塞維    英文名稱(chēng)：    Rosavin    :    84954-92-7    分子式：    C20H28O10    428.43    20mg
 酪醇    英文名稱(chēng)：    4-Hydroxyphenethyl alcohol     :    501-94-0    分子式：    C8H10O2    138.16    20mg
紅景天苷    英文名稱(chēng)：    Salidroside    :    10338-51-9    分子式：    C14H20O7    300.3    20mg
荷葉堿    英文名稱(chēng)：    Nuciferine    :    475-83-2    分子式：    C19H21NO2    295.38    20mg
葒草苷    英文名稱(chēng)：    Orientin    :    28608-75-5    分子式：    C21H20O11    448.38    20mg
異葒草素    英文名稱(chēng)：    Homoorientin    :    4261-42-1     分子式：    C21H20O11     448.38    20mg
*B    英文名稱(chēng)：    cucurbitacin B    :    6199-67-3    分子式：    C32H46O8    558.7    20mg
* E     英文名稱(chēng)：    cucurbitacin E    :    18444-66-1    分子式：    C32H44O8    556.69    10mg
* D    英文名稱(chēng)：    Cucurbitacin D    :    3877-86-9    分子式：    C30H44O7    516.67    10mg
雪膽乙素     英文名稱(chēng)：    Dihydrocucurbitacin F    :         分子式：    C30H48O7        20mg
*甲    英文名稱(chēng)：    Curcurbitacin IIa    :    58546-34-2    分子式：    C32H50O8    562.73    20mg
黃獨(dú)素B    英文名稱(chēng)：    Diosbulbin B    :    20086-06-0    分子式：    C19H20O6         20mg
黑芥子苷    英文名稱(chēng)：    Sinigrin     :    3952-98-5    分子式：    C10H16KNO9S2    397.49    20mg
湖貝堿甲     英文名稱(chēng)：    Hupehenine    :    98243-57-3    分子式：    C27H45NO2    415.65    20mg
葫蘆巴堿    英文名稱(chēng)：    Trigonelline     :    535-83-1    分子式：    C7H7NO2    137.14    20mg
鹽酸葫蘆巴堿    英文名稱(chēng)：    Trigonelline Hydrochloride    :    6138-41-6    分子式：    C7H8ClNO2    173.6     20mg
琥珀酸    英文名稱(chēng)：    Butane diacid    :    110-15-6    分子式：    C4H6O4    118.09    200mg
 環(huán)氧續(xù)隨子醇    英文名稱(chēng)：     Epoxylathyrol    :     28649-60-7    分子式：     C20H30O5    " 350.45
"    20mg
黃腐酚    英文名稱(chēng)：     Xanthohumo    :    6754-58-1     分子式：    C21H22O5     354.4    20mg
AGS人胃腺癌細(xì)胞操作方法胡椒堿    英文名稱(chēng)：    Piperine    :    94-62-2    分子式：    C17H19NO3    285.34    20mg
絞股藍(lán)皂苷    英文名稱(chēng)：    Gynostemma Pentaphyllum P.E. Gypenoside    :    11028-00-5     分子式：    C41H68O13    768.975    20mg
絞股藍(lán)皂苷XLIX    英文名稱(chēng)：    Gypenoside XLIX    :        分子式：    C52H86O21    1047.2266    10mg
菊苣酸    英文名稱(chēng)：    Cichoric acid    :    70831-56-0    分子式：    C22H18O12    474.37    20mg
N-甲基野靛堿    英文名稱(chēng)：    Caulophylline    :    486-86-2    分子式：    C12H16N2O    204.27    20mg
金雀花堿    英文名稱(chēng)：    Cytisine    :    485-35-8    分子式：    C11H14N2O    190.24    20mg
積雪草酸    英文名稱(chēng)：    Asiatic acid    :    464-92-6    分子式：    C30H48O5    488.7    20mg