購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
VA 人* 規(guī)格： 48T/96T
MTF 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白 規(guī)格： 48T/96T
MAP-2 人微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格： 48T/96T
MAP-2 人微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格： 48T/96T
omentin 人網(wǎng)膜素 規(guī)格： 48T/96T
AOPP 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物 規(guī)格： 48T/96T
RAGE/AGER 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 規(guī)格： 48T/96T
AGEs 人晚期糖基化終末產(chǎn)物 規(guī)格： 48T/96T
extein 人外顯肽 規(guī)格： 48T/96T
SA 人唾液酸 規(guī)格： 48T/96T
DUTP 人脫氧尿三磷酸 規(guī)格： 48T/96T
DPD 人脫氧膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格： 48T/96T
Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 DNase-Ⅰ 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
DPD 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 規(guī)格： 48T/96T
DHEA-S 人脫氫表雄酮硫酸酯 規(guī)格： 48T/96T
MT 人褪黑素 規(guī)格： 48T/96T
HAase 人透明質(zhì)酸酶 規(guī)格： 48T/96T
HABP 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HA 人透明質(zhì)酸 規(guī)格： 48T/96T
CP/CER 人銅藍(lán)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HOXB2 人同源框B2 規(guī)格： 48T
shēng huà shì jì 鋁
shēng huà shì jì 硫酸亞鈰 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸鋅 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸銅 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸鐵 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸鈦 容量： 25克
shēng huà shì jì 硫酸鍶 容量： 25克
shēng huà shì jì 硫酸鈰銨 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸鈰 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 硫酸十二烷基鈉瓊脂 容量： 100克
shēng huà shì jì 硫酸鉛 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 硫酸鎳銨 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 硫酸鎳 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 硫酸錳 容量： RT 5克
shēng huà shì jì * 容量： RT 10克
shēng huà shì jì 硫酸鋁鉀 容量： 1克
shēng huà shì jì 硫酸鋁銨 容量： 保存：-20℃ 250毫克
shēng huà shì jì 硫酸鋁 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 硫酸鋰 容量： 2～8℃，避光 250毫克
shēng huà shì jì 硫酸鈷 容量： 5克
shēng huà shì jì 硫酸鉻鉀 容量： RT 500毫升
shēng huà shì jì 硫酸鎘 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 硫酸鋯 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 硫酸鈣 容量： RT 500毫克
shēng huà shì jì 硫酸鉍 容量： RT 10克
shēng huà shì jì 硫酸銨 容量： 50克
/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
