購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白結(jié)合蛋白 規(guī)格： 48T/96T
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*50 HBsAg 人乙型肝炎表面抗原 規(guī)格： 48T/96T
HPA 人乙酰肝素酶 規(guī)格： 48T/96T
ChE 人乙酰*酯酶 規(guī)格： 48T/96T
AChRab 人乙酰*受體抗體 規(guī)格： 48T/96T
ACH 人乙酰* 規(guī)格： 48T/96T
AD 人乙胺碘呋酮 規(guī)格： 48T/96T
PL 人胰脂肪酶 規(guī)格： 48T/96T
Pancreastatin 人胰抑制素 規(guī)格： 48T/96T
人胰腺癌標志物CA242ELISA Kit，48T/96T 人胰腺癌標志物CA242ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
PK 人* 規(guī)格： 48T/96T
GLP-1 人胰高血糖素樣肽1 規(guī)格： 48T/96T
GC 人胰高血糖素 規(guī)格： 48T/96T
PP 人胰多肽 規(guī)格： 48T/96T
Amylin 人胰淀素 規(guī)格： 48T/96T
PAMY 人胰* 規(guī)格： 48T/96T
IA-2A 人胰島細胞抗原2抗體/蛋白*磷酸
shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅲ 容量： 25克
shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅰ 容量： 5克
shēng huà shì jì 偶氮二甲酰胺 容量： 5克
shēng huà shì jì 偶氮苯 容量： 1升
shēng huà shì jì 諾納德P40 容量： 500克
shēng huà shì jì 牛胰島素 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 牛血纖維蛋白原 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白標準溶液 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白(第五組份) 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白 容量： 100克
shēng huà shì jì 牛肉浸膏 容量： 500克
shēng huà shì jì 牛肉粉 容量： 500克
酶抗體 規(guī)格： 48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
