原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1M)(預(yù)活化)100ml使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1M)(預(yù)活化)100ml使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1M)(預(yù)活化)100ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
FGF18 Protein Mouse 重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
V79倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC
Calu-6(人肺退行性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞HPrMEC
人食道平滑肌細(xì)胞cDNAHESMC cDNA
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2 *-EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mL
MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human
PLA2G2A Others Human 人 PLA2G2A / PLA2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC
CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MCF7細(xì)胞 PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞)
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;C918
OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA試劑盒 ,英文名: APAF1 ELISA Kit
人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanneurofilamentprotein,NFELISAKit 96T/48T
大鼠*Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit
英文名稱RatThyroidAbELISAKit大鼠甲狀腺素抗體(ThyroidAb)規(guī)格:96T/48T
酵母單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitDNase-Ⅰ人脫氧核糖核酸酶Ⅰ規(guī)格:48T/96T
人游離原卟啉(FEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human recombination activating gene 2 (RAG-2) ELISA Kit 人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒
HumanCarcinoembryonicFerritin,CEFELISAKit 人癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanintegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISA試劑盒人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanLactateDehydrogenase,LDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1M)(預(yù)活化)100ml使用說(shuō)明書(shū)大鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝