描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人小梁網(wǎng)細(xì)胞鑒定試劑盒價(jià)格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963525 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1417221-06-7 H-Cys(NPys)-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-NH2 1mg Fructus aurantii immaturus枳實(shí)探針法PCR鑒定試劑盒
1417221-06-7 H-Cys(NPys)-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-NH2 5mg Rhizoma anemarrhenae知母探針法PCR鑒定試劑盒
103429-32-9 H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2 1mg Rhizoma anemarrhenae知母探針法PCR鑒定試劑盒
103429-32-9 H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2 5mg Radix astragali preparata炙黃芪探針法PCR鑒定試劑盒
139592-37-3 (Fmoc-Cys-OtBu)2 1g Radix astragali preparata炙黃芪探針法PCR鑒定試劑盒
4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine 145783-14-8 中文名: 分子式:C7H7Cl2N3O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 145783-15-9 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester 188742-80-5 中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞?/span> 分子式:C26H26O12 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 抗氧化; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 35202-54-1 中文名: 分子式:C11H11NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 1α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MIP-1α/CCL3
4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine 28783-41-7 中文名: 分子式:C7H10ClNS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠N--D-天門冬酸受體亞單位1型 英文名稱: Mouse N-methyl-D-aspaate receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NMDA-R1
人小梁網(wǎng)細(xì)胞鑒定試劑盒價(jià)格101917-30-0 sodium 4-pentynoate 10mg Radix platycodonis桔梗染料法PCR鑒定試劑盒
101917-30-0 sodium 4-pentynoate 10mM*1mLinDMSO Radix platycodonis桔梗染料法PCR鑒定試劑盒
101917-30-0 sodium 4-pentynoate 50mg Semen arecae prepareta焦檳榔染料法PCR鑒定試劑盒
1019206-88-2 Regorafenib monohydrate 100mg Rhizoma curcumae longae姜黃染料法PCR鑒定試劑盒
1019206-88-2 Regorafenib monohydrate 10mg Lignum dalbergiae odoriferae降香染料法PCR鑒定試劑盒
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。