我司草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino
BTC Others Cynomolgus 食蟹猴 BTC / Betacellulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
16HBE細(xì)胞,人支氣管上皮細(xì)胞 化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞,TMNE細(xì)胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HVMF-c 人類絨毛間質(zhì)成纖維細(xì)胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
臍靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC 1469 [NCTC1469]
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞,NG108-15[108CC15]細(xì)胞 LM8細(xì)胞,C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
AXL Others Human 人 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
18. 卵巢細(xì)胞系統(tǒng)
人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)
CM-R072大鼠腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖維膠凝蛋白3(FCN3)免疫試劑盒 Human FCN3 ELISA Kit
超氧陰離子測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatMyoglobin,MYO/MBELISA試劑盒大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanluteotropichormone,LHELISAKit*(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
HumanInsulin,INSELISAKit 人胰島素(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanclusterOfdifferentiation,CDl4ELISA試劑盒人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanrheumatoidarthritisassociatednuclearartigen,RANAELISAKit人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝