天青石藍B染色液50ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
天青石藍B染色液50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
天青石藍B染色液50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠氣管上皮細胞;RTE
CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細胞裂解液 (陽性對照)
PG49細胞,人肺腺癌細胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA1細胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
輸尿管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HDLEC-c adult 人類皮膚淋巴管內(nèi)皮細胞(HDLEC)來自成年捐獻者 500,000cells 頜下腺上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
T-103AI型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
TU 686細胞,人喉癌細胞 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV-304細胞 中國倉鼠卵巢細胞-二氫*還原酶缺陷型;CHO/dhFr-
C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2
CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照)
人海馬趾神經(jīng)細胞HN-h
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3
SPC-A1細胞,人肺腺癌細胞 綠猴腎細胞,Vero細胞 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
Sf-9(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK.f-c 正常人表皮角質(zhì)形成細胞(NHEK)少年,單一來源 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)ELISA試劑盒 ,英文名: AT1R ELISA Kit
人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA檢測試劑盒HumanAdenovirusAntigen,ADV-AgELISAKit 96T/48T
大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉(zhuǎn)移酶,線粒體(PGS1)免疫試劑盒 Rat PGS1 ELISA kit
CLIAKitforsE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96T
*核酸-蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒10次
ELISAKitCSF人集落刺激因子規(guī)格:48T/96T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒
HumanAnti-OvaryAntibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancholecystokinin,CCKELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫外可見光分析20樣本
HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青石藍B染色液50ml使用說明書人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝