我司細胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說明書本著標準*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
細胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Hs 746T(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)
KLRC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽性對照)
PC-3細胞,人胰腺癌細胞 人表皮癌細胞,A-431細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3
人晶狀體上皮細胞總RNAHLEpiC tRNA
Gibco 17100017 Collagenase Type I 1g
CM-R041大鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基100mL
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脊柱間充質(zhì)干細胞HVMSC
JEG-3/VP16細胞,人絨癌細胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞,NBTF細胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞HAMSC
IM-9(人外周血B淋巴細胞) 5×106cells/瓶×2
95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人真皮淋巴上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1
三.小鼠正常細胞
人腸平滑肌細胞RNAHISMC miRNA5 μg
小鼠髖動脈內(nèi)皮細胞;PIEC
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22 小鼠破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
NRK-52E,大鼠腎細胞 Rattus
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)免疫試劑盒 Human AT2R ELISA Kit
人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 ,英文名: AAA ELISA Kit
Ratkeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglycogensynthasekinase,GSKELISA試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人*11(KLK11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human peptidylprolyl CIS trans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒
HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBcelldifferetiationfactor,BCDFELISA試劑盒人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料油菜籽(rapeseed)基因檢測試劑盒20次
HumanThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說明書人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人組胺(HIS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝