臺盼藍染色液 (0.4%)50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
臺盼藍染色液 (0.4%)50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
臺盼藍染色液 (0.4%)50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HCC827(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
獼猴皮膚細胞;MMS7
EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
LOVE1細胞,結直腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,B16細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-29
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701]
ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0119HuH-6(人肝母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
IgG3 Others Mouse 小鼠 IgG3-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肝內膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 MC3T3-E1 Subclone 14 in mouse parietal bone cell sub clone 14 before a-MEM培養(yǎng)基+10%FBS
OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽)
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細胞)
IL25 Others Rat 大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解液 (陽性對照)
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z
SD大鼠骨髓間質干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
SK-N-SH細胞,人神經(jīng)上皮瘤細胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg
SF767(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HCT-15(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒 Human VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit
人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: PR3 Ab-IgG ELISA Kit
RatInterleukin32,IL-32ELISA試劑盒大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglutamicaciddecarboxylase,GADELISA試劑盒人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanArachidonicAcid,AAELISA試劑盒人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20次
Humanthyroidhormoneautoantibodies,THAAELISAKit人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
臺盼藍染色液 (0.4%)50ml實驗方法兔乙酰*(ACh)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝