Caspase 8抑制劑200ul免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Caspase 8抑制劑200ul免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-M045小鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
TE-1細胞,人食管癌細胞 人腦瘤細胞,SF17細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S3
小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA
CD48 Others Human 人 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜細胞;WISH
IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0343HA(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2
P3-NS-1/1-Ag4.1細胞,骨髓瘤細胞 人T細胞白血病細胞,6T-CEM細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9402
幼蚊細胞;C6/36
SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照)
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1 結腸腺癌細胞,LS 174T細胞 RPC細胞,大鼠垂體細胞
CNE1, 人鼻咽癌細胞系 Human
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠干擾素β(IFNβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNβ ELISA Kit
人血清白蛋白(HSA)ELISA檢測試劑盒Humansreumalbumin,HSAELISAKit 96T/48T
大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒 Rat neuropeptide Y,NPY ELISA kit
英文名稱RatPGE1ELISAKit大鼠前列腺素E1(PGE1)規(guī)格:96T/48T
活體細胞半*蛋白酶-8(PASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒20次
ELISAKitFRA人纖維連接素相關抗原規(guī)格:48T/96T
小鼠骨保護素(OPG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human orexin receptor (OXR) ELISA Kit 人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒
HumanPancreastatinELISAKit 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-scl70antibody,SCL70/topoⅠELISA試劑盒人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞周期S期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humantrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase 8抑制劑200ul免費代測小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠CD163分子(CD163)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝