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Caspase 9 活性檢測試劑盒-熒光100T使用說明書

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  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-07-06
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
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  • 產(chǎn)品數(shù)量9968
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Caspase 9 活性檢測試劑盒-熒光100T使用說明書 產(chǎn)品詳情

 

Caspase 9 活性檢測試劑盒-熒光100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 9 活性檢測試劑盒-熒光100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 9 活性檢測試劑盒-熒光100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
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CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照)

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豬腎傳代細胞;IBRS-2

EGFR Others Human EGFR / ErbB1 人細胞裂解液 (陽性對照)
荷蘭黑白花奶牛牛肺細胞;DCL1

IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小氣道上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

Rb細胞,人視網(wǎng)膜母細胞瘤 宛氏擬青霉 人癌細胞;MDA-MB-468

ANGPT2 Protein Human 重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標簽)

Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照)
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照)

盤羊皮膚細胞;ASHS2

人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

Y79細胞,人視網(wǎng)膜母細胞瘤 球毛殼霉 小鼠肺腺癌細胞系;LA795

CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 標簽)

Lncap clone FGC(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照)
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關(guān)鍵詞:流式細胞儀 顯微鏡
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