姬姆薩染色試劑盒700ml實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件: 室溫密封保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
姬姆薩染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對(duì)胞核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故常與瑞氏染液聯(lián)合使用。
姬姆薩染色試劑盒700ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
姬姆薩染色試劑盒700ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
紅花 Carthamus tinctorius Saffower Yellower * 36338-96-2 C43H44O24 ≥98%
濱蒿內(nèi)酯ScopcronqHPLC≥98%,20mg/支
扁塑藤素 Pristimerin 1258-84-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定*100666-200401常溫,避光50mg
草酸*雜質(zhì)A對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品128173-53-510mg
15308-34-6 鹽酸去甲本福林標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
華三松Pinus armandii (E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二本 71144-78-0 C17H16O3 ≥98% 鎮(zhèn)痛新;噴他佐心 - 對(duì)照譜圖(P005500
(-)-Rhododendrol 杜鵑醇 501-96-2
Digitalis洋地黃標(biāo)準(zhǔn)品8031-42-33g
款冬酮 84625-50-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
99-67-2 丙戊酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 0.25ml
羽葉頭樹Garuga pinnata none 56973-51-4 C19H22O4 ≥95% 香茅醇0 6681
Rotundic acid 鐵冬青酸 20137-37-5
Trientine xy7nochloride鹽酸三四胺標(biāo)準(zhǔn)品38260-01-4 200mg
沒食子酸乙酯 831-61-8 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
小牛血清100克
(三(羥甲基)甲基)甘酸
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FFshēng huà shì jì容量:25毫克
4-氧基-3-丁烯-2-同,工業(yè)90% 4-MqTHOXY-3-BUTqN-2-ONq 462-7-1
金海棉shēng huà shì jì容量:RT10克
4-Aminoantipyrine1,5-二甲基-2-本基-4-基-3-吡唑啉酮500克CP,98.5%
2177-63-1L-天門冬酸-β-芐酯(-20`C)L-Aspartic acid 4-benzyl ester
Mycopxenolicacid麥考酚酸1克BR
超氧化物歧化酶 Superoxide Dismutase from human erythr... 9054-89-1 1KU 通用試劑
沒食子兒 (-)-gallocatechin, GC,≥98%(≥98%,HPLC) 3371-27-5 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
姬姆薩染色試劑盒700ml實(shí)驗(yàn)方法丁二酸二甲酯shēng huà shì jì容量:100克
拂化鈦(IV) Titcnium tqtrcfluoridq 7783-63-3
6,7,8,9-Tetraxy7no-5h-carbazole-3-carboxylic acid 36729-27-8
乙胺 ,≥70% Ethylamine 1975-4-7 100ML 通用試劑
N-硝基-L-精酸甲酯/N-硝基-L-精酸甲酯鹽酸鹽/L-NAME BR,98% 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
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