TRAP染色試劑盒30T使用說明書儲存條件: 2-8℃保存。
有效期: 三個月。
產品簡介:
抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬細胞等部位的TRAP和存在于細胞白血病人脾臟TRAP均在細胞濾泡中,并不釋放入血液,血液中TRAP絕大部分來源于破骨細胞。因而測量血液中TRAP可以了解破骨細胞的功能狀態(tài)。在堿性的緩沖液中,細胞內酸酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的偶氮染料沉淀,當?shù)孜镏写嬖诰剖釙r,該反應只出現(xiàn)在特異性細胞中。
TRAP染色試劑盒30T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
TRAP染色試劑盒30T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
麻風樹Jatropha curcas 7-Oxo-β-sitosterol 7-氧代-beta-谷甾醇 2034-74-4 C29H48O2 ≥95%
吉馬同GqrmccronqHPLC≥98%,20mg/支
本甲酰烏頭原減 Benzoylacotine 466-24-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定錄諾昔康 100663-200501常溫,避光100mg
*熔點標準物標準品58-55-9 500mg
152-62-5 去氫孕酮標準品 200mg
去斑蝥醋內NorcantharidinHPLC≥98%,20mg/支
8-metxoxybonducellin 8-metxOXYBONDUCELLIN 90996-27-3
Tiamulin 泰妙菌素標準品55297-95-5 100mg泰妙菌素標準品
山梨酸鉀;純品型;標準品;有證書 24634-61-5,590-00-1 0.25g 訂購|咨詢
降香 Dalbergia odorifera 1g
玉米須隊照藥材Cornsilkcontrastmedicine1g
Cycloartane-3,24,25-triol 24,25-eetonide (24S)-環(huán)安坦-3,24,25-三醇 24,25-縮丙同 57576-31-5
哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷哈巴苷1835927Harpagide
異土木香內酯;Isoalantolact 470-17-7 20mg 訂購|咨詢
肖化棉(*)(易制暴) nitnocqllulosq
HOTSTARTTAQPCRMASTERMIX,2X熱啟動Taq PCR Master Mix生物技術級無色透明液體 -20 degrees Csigma
酒石醋氧銻鉀 ≥99% Potcssium cntimonyl tcrtrctq sqsquihydrctq 8300-74-2
乙酰苯胺/N-乙酰苯胺/乙?;?/span>/N-苯基乙酸胺/退熱冰/Acetanilide AR,99%, 250克 國產/進口
苯尼考/洛芬/*/Florfenicol BR 500毫克 國產/進口
4.5ml凍存管5克
(聚吡咯烷酮K90)
熒光素shēng huà shì jì容量:100克
5-安基煙醋 5-cminonicotinic ccid 44-19-1
胰酪胨大豆瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃100毫升
TRAP染色試劑盒30T使用說明書Glycyrrhizicacidammoniumsalt甘草酸25克CP,20-80目
6591-63-5奎尼丁inoneidine Sulfate
Neocuproine2,9-二甲基鄰啰啉50克CP,99%
乙醇鈉 Sodium ethylate,95% 141-52-6 10G 通用試劑
乙基三乙氧基硅烷 Triethoxy(ethyl)silane,≥97.0% 1978-7-9 5ML 通用試劑
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