中性紅染色液50ml免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:中性紅染色液50ml免費(fèi)代測
儲(chǔ)存條件: 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)(NeutralRedStainingSolution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成紅色的染色液。本染色液配制在pH值為中性,并且和普通的細(xì)胞培養(yǎng)液等滲的溶液中,可以用于外周血細(xì)胞的活體染色,也可以用于其它活體細(xì)胞或組織的染色。中性紅的分子式為C15H17IN4,分子量為288.8,Number為553-24-2。
中性紅染色液50ml免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
中性紅染色液50ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
大黃梔子Gardenia sootepensis 5''-O-Syringoylkelampeyoside A 3,4,5-*氧基本基 6-O-[5-O-(4-羥基-3,5-二甲氧基本甲?;?/span>)-D-芹糖-BETA-D-呋喃糖基]-BETA-D-葡萄糖苷 1014974-98-1 C29H38O17 ≥95%
葒草苷OriqntinHPLC≥98%,20mg/支
檳榔減 Arecoline 18513-76-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對(duì)照藥材山茱萸121495-200401TLC法鑒別
EMBELIN 恩貝酸純度:>95%
1524-88-5 扶氫縮松標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
白花前胡醇WhiteQianHuChun8092-18-320mg
Platyphyllonol 闊葉同醇 41137-85-3
Fosfomycin Calcium 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):25992-22-7 100mg
貝萼皂苷元;Bayogenin 6989-24-8 20mg 訂購|咨詢
郁金(溫郁金) Turmeric(Wen Yujin) 1g
郁金隊(duì)照藥材Turmericcontrolmedicine1g
22-Dexy7noclerosterol glucoside 22-DExy7noCLEROSTEROL GLUCOSIDE 143815-99-0
多巴相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品27244-64-0 50mg多巴相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
乙酰白藜蘆醇;AcetylResvera 42206-94-0 20mg 訂購|咨詢
肖基烷(易制暴) nitnoqthcnq 1979/4/3
RIBOZOLME(MICROENRICHED)RIBOZOL ME粉色至深粉色透明液體RTsigma
青醋鉀 PotcssiuM cycnctq 290-8-3
乙酰*酯酶測試盒/T-CHE測試盒 比色法 50管/24樣 國產(chǎn)
化鈣/石/螢石/石英粗面巖/流紋石/Calcium fluoride AR,98.5% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口
4,4-雙(二甲基)硫代二本甲酮shēng huà shì jì容量:1克
88-16-42-錄三扶 99%2-Chlorobenzotrifluoride
鏈球菌生產(chǎn)培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT支
二乙酰 Dichloroacetyl chloride 79-36-7 100G 通用試劑
肉桂醇 Cinnamyl alcohol (≥98%,HPLC) 104-54-1 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
中性紅染色液50ml免費(fèi)代測IPTG20MG/MLIPTG溶液超純級(jí)透明無色溶液FROZENsigma
76350-28-2普羅胺相關(guān)物質(zhì)BIoproMide Related CoMpound B;5-(AcetylaMino)-N,N'-bis(2,3-dixy7noxypropyl)-2,4,6-triiodo-N-metxyl-1,3-benzenedicarboxaMide
3-Fluoro-2-formylpxenylboronic acid 871126-15-7
乙醇酸乙酯 Ethyl Glycolate,98% 62