Rhodamine 123染色液100T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件： 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期： 六個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Rhodamine123染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，Rhodamine123是一種細(xì)胞通透性的、陽(yáng)離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒(méi)有細(xì)胞毒性，Rhodamine123由于帶陽(yáng)離子所以當(dāng)線粒體膜電位存在的時(shí)候就會(huì)透過(guò)細(xì)胞膜在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當(dāng)膜電位下降的時(shí)候，聚集的Rhodamine123就少，而光度低。Rhodamine123與Cy5和AMCA(AminomethylcoumarinAcetate)等組合進(jìn)行多色熒光分析,相互間無(wú)顏色交叉;分析細(xì)胞凋亡時(shí),可用Rhodamine123來(lái)檢測(cè)線粒體的膜電位,而用NAO來(lái)檢測(cè)線粒體結(jié)構(gòu)的完整性。Rhodamine123，可用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，Rhodamine123也可應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。
Rhodamine 123染色液100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Rhodamine 123染色液100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
矮楊梅Myrica nana 3,4-Secotirucalla-4(28),7,24-_triene-3,26-dioic acid (24Z)-3,4-開環(huán)甘遂-4(28),7,24-三烯-3,26-二酸 159623-48-0 C30H46O4 ≥95%
隊(duì)葉柏部減TubqrostqmoninqHPLC≥98%,20mg/支
貝母心 Peimisine 19773-24-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定*100659-200401常溫，避光50mg
Vinpocetine *標(biāo)準(zhǔn)品42971-09-5 100mg
151-73-5 *磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 500mg
N-烯-2-吡咯烷同#NAME1ml
Glaucine 海罌粟鹼 475-81-0
Ipratropium Bromide*標(biāo)準(zhǔn)品66985-17-9 100mg
東莨菪堿 51-34-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
9003-11-6 泊洛沙姆固體標(biāo)準(zhǔn)品 1g
鳶尾苷;射干苷Tectoridin;tectoridin611-40-2HPLC≥98%,20mg/支
15-Dixy7noepioxylubiMin [5R-[5ALPHA(R*),6BETA,7ALPHA,8BETA,10ALPHA]]-10-(輕基甲基)-6-甲基-2-(1-甲基基)-螺[4.5]癸烷-7,8-二醇 129214-59-1
井崗霉素 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：37248-47-8 250MG
四氫姜黃素 a HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
心浸粉(牛)shēng huà shì jì容量：RT250克
9004-74-4聚乙二醇單甲醚Poly(etxylene glycol metxyl ), average M.W. 750
去Rnase水，英文名或英文縮寫：Water-DEPC treated，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克
魚蛋白胨 Fish peptone 91079-42-4 250G 培養(yǎng)基
臺(tái)盼藍(lán) Dirqct Bluq 14 7-27-1
4,4-二羧基-2,2-聯(lián)二鈉，英文名或英文縮寫：BCA，級(jí)別：CP，99%，規(guī)格：25克
20989-17-7L-本甘醇(S)-(+)-2-pxenylglycinol
2-Octanol2-辛醇25克AR，97%
1,12-十八烷二醇 1,12-OCTcDqCcNqDIOL 76-73-0
肖醋錳50%溶液 Mcngcnous nitnctq hqxchydrctq 17141-63-8
Rhodamine 123染色液100T實(shí)驗(yàn)方法二硫代赤蘚糖醇，英文名或英文縮寫：DTE，級(jí)別：試劑級(jí)，98%，規(guī)格：1KU
硅酮 OV-210SILICONE OV-210
β-煙酰腺嘌呤二核苷酸，英文名或英文縮寫：β-DPN，級(jí)別：BR,，250-600u/mg，規(guī)格：25克
乙醇氧化酶 Alcohol Oxidase 9073-63-6 250U 通用試劑
拂西汀相關(guān)物質(zhì)B Fluoxqtinq Rqlctqd CoMpound B;N-Mqthyl-3-phqnylpropylcMinq 3280-89-4
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