產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：土拉弗朗西斯菌熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
貨號：CP99423
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
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109434-27-7 Fmoc-Ser(tBu)-ODhbt 1g Mouse Hepatitis Virus(MHV)小鼠肝炎病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
109434-27-7 Fmoc-Ser(tBu)-ODhbt 25g Mouse Leukemia Virus(MLV)小鼠白血病病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
109434-27-7 Fmoc-Ser(tBu)-ODhbt 5g Mouse Leukemia Virus(MLV)小鼠白血病病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
109437-62-9 673 A 10mg Serpulina spp.小蛇菌屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
巖白菜素Bergenin質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 小鼠誘導(dǎo)型合酶(NOS2)ELISA試劑盒 ，英文名： NOS2 ELISA Kit ELISAKitEPI豬規(guī)格：48T/96T
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鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿Palmatine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR 犬基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit 人糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鹽酸黃柏堿(標準品)Phellodendrine chloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 英文名稱HumanangiotensionIIELISAKit人血管緊張素II(ANGII)規(guī)格：96T/48T 豬白介素18(IL-18)試劑盒 Porcine Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit
土拉弗朗西斯菌熒光PCR法檢測試劑盒DU 145, 人前列腺癌細胞檸檬酸一水質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARCitric acid monohydrate
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞，hFOB 1.19細胞 PIEC(豬髖動脈內(nèi)皮細胞)Salubrinal質(zhì)量規(guī)格：>98%,eIF2α選擇性抑制劑Salubrinal
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H157塞來昔布，塞內(nèi)昔布，賽利克西質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Celecoxib
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 (陽性對照) 塞來昔布，塞內(nèi)昔布（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Celecoxib
KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株;G422鹽酸金霉素,四環(huán)素質(zhì)量規(guī)格：>95%,EP,BRChlortetracycline HCl
