Minucells and Minutissue灌注培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)
① 支持多種組織細(xì)胞的選擇。
② 排除了胞外基質(zhì)材料中膠原成份對(duì)細(xì)胞分化的影響。
③ 可對(duì)新鮮組織細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)灌注培養(yǎng)。
④ 可進(jìn)行細(xì)胞的*體外培養(yǎng)。
⑤ 體外灌注培養(yǎng)條件下可見(jiàn)細(xì)胞增長(zhǎng)與增殖。
⑥ 可進(jìn)行生物材料支持下的三維細(xì)胞培養(yǎng)。
系統(tǒng)介紹
Minusheet三維灌流系統(tǒng)設(shè)計(jì)有專(zhuān)門(mén)的封閉式的培養(yǎng)小室，聯(lián)合蠕動(dòng)泵，采用灌流系統(tǒng)進(jìn)行體內(nèi)模擬細(xì)胞培養(yǎng)，
使細(xì)胞能夠聚集生長(zhǎng)，形成組織樣結(jié)構(gòu)，很好的模擬體內(nèi)生理狀況，可以更直觀的反映細(xì)胞生物學(xué)和功能，
更準(zhǔn)確的構(gòu)建靶組織模型，不僅可以培養(yǎng)單一細(xì)胞，而且還可以進(jìn)行多種細(xì)胞的共培養(yǎng)。
利用3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞形成3D微組織，從而更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，更直觀的反映細(xì)胞生物學(xué)和功能，
更準(zhǔn)確的構(gòu)建靶組織模型。
可用于幾乎任何類(lèi)型細(xì)胞的3D培養(yǎng)，包括細(xì)胞系、原代細(xì)胞、干細(xì)胞及多種細(xì)胞共培養(yǎng)。應(yīng)用范圍涉及癌癥研究及
藥物分析，細(xì)胞生物學(xué)研究和組織工程，吸收、分布、新陳代謝、排泄及毒性測(cè)試（ADME-TOX)，藥物代謝動(dòng)力學(xué)（DMPK）。
傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿依賴(lài)于培養(yǎng)箱提供CO2和濕度環(huán)境進(jìn)行生長(zhǎng)，而這些條件由于沒(méi)有得到嚴(yán)格的控制，使得模擬的生
長(zhǎng)環(huán)境*不同于嚴(yán)格意義上的體內(nèi)環(huán)境，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)存在一定的偏差；且傳統(tǒng)培養(yǎng)容器的操作和培養(yǎng)的開(kāi)放性，
不能及時(shí)保持培養(yǎng)液的新鮮、不能保證代謝物的及時(shí)排除。容易導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生污染，而3D（三維）細(xì)胞培養(yǎng)克服了這些問(wèn)題,
該系統(tǒng)自帶的熱板和氣體交換模塊，實(shí)時(shí)保證了細(xì)胞所需要的溫濕度,適合細(xì)胞在保持養(yǎng)分不變的*培養(yǎng)，
顯微腔室便于實(shí)時(shí)培養(yǎng)觀察，梯度培養(yǎng)腔室使得培養(yǎng)環(huán)境更類(lèi)體內(nèi)環(huán)境。
系統(tǒng)亮點(diǎn)
充分的養(yǎng)分保障及時(shí)代謝物的排除，提高了細(xì)胞密度
連續(xù)灌注的培養(yǎng)基提供了充分的營(yíng)養(yǎng)成分, 并可帶走代謝產(chǎn)物, 同時(shí), 細(xì)胞保留在反應(yīng)器系統(tǒng)中,可以達(dá)到很高的細(xì)胞密度
不用CO2培養(yǎng)箱提供溫濕度環(huán)境，該系統(tǒng)自帶的熱板和氣體交換模塊，實(shí)時(shí)保證了細(xì)胞所需要的溫濕度
應(yīng)用細(xì)胞類(lèi)型廣泛，幾乎可以應(yīng)用到任何類(lèi)型細(xì)胞的3D培養(yǎng)。
圖1. 細(xì)胞類(lèi)型
3)可以聯(lián)用顯微鏡
Chamber上下兩側(cè)都是透明的，可以聯(lián)合顯微鏡直接觀察，甚至在灌流的過(guò)程中也可以觀察。
圖2. Chambers類(lèi)型大全
4).可以采用梯度培養(yǎng)，不同種類(lèi)的細(xì)胞共培養(yǎng)。
可以采用不同的培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞進(jìn)行灌沖，這樣能更好的模擬體內(nèi)的環(huán)境，實(shí)驗(yàn)更準(zhǔn)確。
圖3.梯度灌流
圖4. 兩種細(xì)胞的共培養(yǎng)
4).可以*培養(yǎng)
樣品可以灌注培養(yǎng)高達(dá)數(shù)月，可以進(jìn)行周期較長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用范圍
1.可消除造血細(xì)胞靜態(tài)培養(yǎng)中存在的濃度梯度和懸浮培養(yǎng)時(shí)換液引起的波動(dòng),為造血細(xì)胞體外擴(kuò)增提供更理想的培養(yǎng)環(huán)境
2.灌注培養(yǎng)有利于造血干(祖)細(xì)胞的進(jìn)一步擴(kuò)增,培養(yǎng)得到的細(xì)胞中干(祖)細(xì)胞含量較高,培養(yǎng)規(guī)?？梢赃_(dá)到臨床要求
3.使重組蛋白質(zhì)的產(chǎn)率增加，灌注培養(yǎng)的方法還可以延緩細(xì)胞的衰退
4.注培養(yǎng)有利于體外高活性有功能的軟骨組織工程的構(gòu)建。灌注培養(yǎng)得到的DNA和糖胺聚糖的含量明顯增高,比用靜態(tài)培養(yǎng)構(gòu)建的軟組織工程含量多,灌注培養(yǎng)對(duì)于構(gòu)建有功能的軟組織工程是一個(gè)比較好的方法。
5.灌注培養(yǎng)也廣泛應(yīng)用于骨組織工程。灌注培養(yǎng)系統(tǒng)里堿性磷酸酶的水平和鈣結(jié)合蛋白的含量比靜態(tài)培養(yǎng)的高;和傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相比,三維灌注培養(yǎng)系統(tǒng)里的環(huán)境更接近體內(nèi)環(huán)境,更能促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨性分
6.由于促進(jìn)細(xì)胞分化的特性,梯度灌注培養(yǎng)特別有助于組織工程細(xì)胞片的構(gòu)建
?灌注培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)細(xì)胞的分泌功能?？梢苑乐挂?yàn)榈鞍姿饷傅淖饔脤?dǎo)致蛋白水解丟失,在提高細(xì)胞產(chǎn)率方面起到很大的作用
7.灌注的生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),能很好地控制物理和化學(xué)因素、培養(yǎng)的微環(huán)境和培養(yǎng)條件,尤其是氧濃度和剪應(yīng)力的問(wèn)題。
(1).可用于幾乎任何類(lèi)型細(xì)胞的3D培養(yǎng)，包括細(xì)胞系、原代細(xì)胞、干細(xì)胞及多種細(xì)胞共
培養(yǎng)。
(2). 癌癥研究及藥物分析
(3). 細(xì)胞生物學(xué)研究和組織工程
(4). 吸收、分布、新陳代謝、排泄及毒性測(cè)試（ADME-TOX)
(5). 藥物代謝動(dòng)力學(xué)（DMPK
Tannic acid label indicates abnormal cell development coinciding with regeneration
of renal tubules
a) After isolation renal stem/progenitor cells (s/pC) are placed between
layers of polyester fleece (PF) to create an artificial interstitium.
The fleece layers are mounted in a Minusheet tissue carrier.
b) For culture the carrier is transferred to a perfusion container with horizontal flow characteristics.
c) Perfusion culture is performed for 13 days under atmospheric air.
During this period always fresh culture medium is transported by a peristaltic pump
(1.25 ml/h) from a storage bottle to the container and then to awaste bottle.
案例1.干細(xì)胞體外研究，此研究應(yīng)用細(xì)胞3D培養(yǎng)系統(tǒng)可以模擬體內(nèi)的正常情況，干細(xì)胞療法應(yīng)用于多種疾病，
但是植入的干細(xì)胞往往被體內(nèi)流體傷害，改變了細(xì)胞外基質(zhì)，為了研究細(xì)胞的的適應(yīng)參數(shù)，更好的起到治療的作用，
采用了體外灌流培養(yǎng)系統(tǒng)，模擬體內(nèi)體內(nèi)的生理環(huán)境。此研究利用細(xì)胞灌流培養(yǎng)技術(shù)體外研究腎小管細(xì)胞的再生機(jī)制。
（Minuth and Denk BMC Clinical Pathology 2014, 14:34）
Reconstruction of Auto-Tissue-Engineered Lamellar Cornea by Dynamic Culture for Transplantation:
A Rabbit Model
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