特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肺炎支原體檢測試劑盒(熒光PCR法)
產(chǎn)品貨號:YS-P013797
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
兔肝配蛋白A受體3 (EPHA3)2,7-二溴-9,9-二(6-溴己)芴(>98.0%(HPLC))纖維蛋白溶酶原抗體
兔抗存活素抗體(Anti-Surv) 2-溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(GC))DNA修復蛋白NBS1抗體
兔糖磷脂酰肌(GPI) 4,7-雙(4,4,5,5-四-1,3,2-二氧雜戊烷-2-)-2,1,3-并噻二唑(>95.0%(GC))蛋白質精氨酸轉移酶1抗體
兔白分化抗原CD99(CD99) 2,7-雙(4,4,5,5-四-1,3,2-二氧雜戊環(huán)-2-)-9,9-二正辛芴(>98.0%(HPLC))色素P450 1A2抗體
兔多形核白彈性蛋白酶(PMN Elastase)9,9-雙(4-溴)芴(>98.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
兔血紅素氧化酶1(HO1) 并環(huán)(>94.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
兔凝血酶/抗凝血酶復合物(TAT)2,7-雙(4,4,5,5-四-1,3,2-二氧戊環(huán)-2-)芘(>97.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
兔補體因子1R(Clr)2,7-二(4,4,5,5-四-1,3,2-二氧戊環(huán)-2-)-9,9-十二烷芴(>98.0%(HPLC))磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體
兔纖維連接蛋白(FN)3-溴三(>98.0%(GC))磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體
兔肺耐藥蛋白(LRP)4,4'-二溴八氟聯(lián)(>95.0%(GC))突觸后密度蛋白93抗體
兔粘蛋白3(MUC3)1,4-二溴-2,5-二氟(>98.0%(GC))磷酸化突觸后密度蛋白93抗體
兔核孔蛋白62KDa(NUP62)4,4'-二溴三(>98.0%(GC)(T))磷酸化突觸后密度蛋白95抗體
兔成纖維生長因子結合蛋白2(FGFBP2)4,4'-二聯(lián)(>98.0%(GC))磷酸化腫瘤抑制因PTEN抗體
兔β內啡肽(β-EP) 1,4-二溴萘(>97.0%(GC))磷酸化腫瘤抑制因PTEN抗體
兔酪氨酸蛋白激酶受體A2(EphA2)2,7-二溴芘(>97.0%(GC))樁蛋白Paxillin抗體
兔紅補體受體1 (CR1) 2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC))磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
肺炎支原體檢測試劑盒(熒光PCR法)IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-4抗體IgG二四酸鐵鈉 CP,98%
IGFBP-5/IBP5 /FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-5抗體IgG二四酸鐵鈉 13.5-18.5% Fe basis
IGSF8/CD3/FITC 熒光素標記免疫球蛋超家族成員8抗體IgG二四酸二鈉鎂 98%
IKB Alpha/FITC 熒光素標記KB抑制蛋白α抗體IgG碳酸烯酯 98.0%
IKB alpha(phospho S32 + S36)/FITC 熒光素標記磷酸化KB抑制蛋白α抗體IgG碳酸烯酯 99%
IKB Beta/FITC 熒光素標記KB抑制蛋白β抗體IgG曙紅Y,溶 AR
phospho-IkB beta (Ser23)/FITC 熒光素標記磷酸化KB抑制蛋白β抗體IgG曙紅Y,溶 Biological stain
IL-1 Alpha /FITC 熒光素標記白介素1α抗體IgG曙紅Y,溶 95%