參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：YS-P013558
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
豬S100鈣結合蛋白A12(S100A12 )O-叔丁-L-絲氨酸酯鹽酸鹽γ-微管蛋白GCP6抗體
豬狀腺結合球蛋白(TBG) L-纈氨酸酯鹽酸鹽β-葡萄糖苷酶1抗體
豬周期素依賴性激酶5(CDK5) L-纈氨酰鹽酸鹽甘氨酸裂解系統(tǒng)H蛋白抗體
豬血管活性腸肽(VIP)1,4-丁二雙鹽酸鹽15號染色體開放閱讀框58抗體
豬雄激素誘導蛋白1(AIG1) 半胱鹽酸鹽淀粉結合域蛋白1抗體
豬Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)甘氨酰鹽酸鹽延伸因子G1抗體
豬前梯度蛋白2(AGR2) L-羥脯氨酸酯鹽酸鹽β葡萄糖苷酶2抗體
豬紅膜蛋白(EMP) D-亮氨酸酯鹽酸鹽β葡萄糖苷酶3抗體
豬可溶性CD14分子(sCD14)L-甘氨酸酯鹽酸鹽膠質母瘤相關蛋白GBAS抗體
豬神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP) D-氨酸酯鹽酸鹽紅糖苷α1抗體
豬胎盤蛋白(PP) 利格列汀;利拉利汀G蛋白結合蛋白1抗體
豬粘蛋白2(MUC2)L-谷氨酸-α-芐酯G蛋白結合蛋白4抗體
豬自身免疫調節(jié)因子(AIRE)L-亮氨酸酯鹽酸鹽G蛋白結合蛋白6體
豬紅藻氨酸離子型谷氨酸受體2(GRIK2) L-氨酸芐酯對磺酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白1抗體
豬膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG) L-氨酰鹽酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白2抗體
豬滑行蛋白β(TXLNb)L-組氨酸鹽酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白3抗體
牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒Persephin PSP抗體磷 分析標準品
SRC src原癌因抗體倍標準溶液 1.00mg/ml
SRC3/KAT13B/AIB1 類固受體輔助活化因子-3標準溶液 100μg/ml,u=4%
Phospho-SRC-3 (Thr24) 磷酸化類固受體輔助活化因子-3磷標準溶液 10μg/ml,u=6%
phospho-Src(Tyr529) 磷酸化Src原癌因抗體三光氣 99%
phospho-Src (Tyr418) 磷酸化Src原癌因抗體正戊 98%
SRF/SAP2/MCM1 生長激素釋放因子抗體(血清應答因子)二異辛 99%
Phospho-SRF (Ser103) 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應答因子)環(huán)戊 99%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
