公司向您推薦大鼠主動脈平滑肌細胞的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠主動脈平滑肌細胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6564 |
產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度??萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長特性,在適當?shù)臅r候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。?
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
賴氨酸脫羧酶試驗1,2-二溴烷 99%TPY肉湯pUNO1-hFCGR3Ac
鳥氨酸脫羧酶試驗2-苯酚 分析標準品TPY液體培養(yǎng)基pUNO1-hFCGR3B
氨基酸脫羧酶試驗對照2-苯酚 98%BCG牛乳培養(yǎng)基pUNO1-hFCGRT
無菌液體石蠟2,4,6-三苯酚 98%KEA瓊脂(不含糖)pUNO1-hFCRL2b
山梨醇發(fā)酵管2,4,6-三苯酚 分析標準品KEA肉湯pUNO1-hFCRL3a
培養(yǎng)基2,4,6-三酚標準溶液 1.00mg/ml,基體:醇靛基質(zhì)試驗用培養(yǎng)基pUNO1-hFCRL4
鼠李糖發(fā)酵管三基酸 99%乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基pUNO1-hFCRL5a
蔗糖發(fā)酵管土槿皮酸 分析標準品,98%pH9.6葡萄糖肉湯pUNO1-hFGF1a
阿拉伯糖發(fā)酵管土槿皮酸 98%乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基pUNO1-hFGF7
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌套裝生化鑒定管 8 種SN0174鄰氧基苯胺 GR,99%改良愛德華瓊脂基礎(chǔ)pUNO1-hFGF9
大鼠主動脈平滑肌細胞苯 分析標準品Streptomycin 硫酸鏈,細胞培養(yǎng)DL-Porcine IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
Porcine IL-2(Interleukin 2) ELISA Kit
苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:二硫化碳(?。?/font>Streptomycin 硫酸鏈,細胞培養(yǎng)阿達帕林Porcine IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit
Porcine IL-4(Interleukin 4) ELISA Kit
苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:醇Streptomycin 硫酸鏈,細胞培養(yǎng)N-(3-二基氨基基)-N'-基碳二亞胺鹽酸鹽Porcine IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit
Porcine KIM-1(Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit
水質(zhì)標樣 分析標準品(劇)Streptomycin 硫酸鏈,細胞培養(yǎng)消旋卡色林鹽酸鹽Porcine LEP(Leptin) ELISA Kit
Porcine LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit
1,2,4-三苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:醇Streptozocin (STZ) 鏈脲佐菌素 Sigma檸檬酸鉛Porcine LIF(Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit
Porcine LZM(Lysozyme) ELISA Kit
1,2,5-三苯標準溶液0.099mg/ml,溶劑:異辛烷Streptozocin (STZ) 鏈脲佐菌素 Sigma雞肉膏Porcine MBP(Myelin Basic Protein) ELISA Kit
Porcine MCP-1(Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit
四碳中石油類 (紅外法)標樣27.5-35-73.3mg/LTetracyclin HCl 鹽酸四環(huán)素維生素B2(核黃素)Porcine MIP-1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit
Porcine MMP-1(Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit
1,2,4,5-四苯標準溶液溶劑:醇Tetracyclin HCl 鹽酸四環(huán)素二氧芐啶Porcine MMP-2(Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit
Porcine MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit
水質(zhì)釩標樣 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% HNO3溶液 (20°C)Tetracyclin HCl 鹽酸四環(huán)素三酰基尿苷Porcine MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit
Porcine MYO(Myoglobin) ELISA Kit
釩標準溶液 500mg/L,溶劑:水Thiamphenicol 砜速凍冰粉Porcine NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit
Porcine NGF(Nerve Growth Factor) ELISA Kit
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。