產(chǎn)品名稱：大鼠雌二醇(E2)抗體elisa試劑盒
英文名稱：Rat EstradiolE2antibody ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結果要在15-30 min內完成，定性測定用肉眼判讀試驗結果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
堿性唾液脯氨酸豐富蛋白2(PRB2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98%(GC) 希瓦氏菌屬 250mg
堿性唾液脯氨酸豐富蛋白1(PRB1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 青春雙歧桿菌 1g
Dickkopf相關蛋白4(DKK4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 烏芝 1g
Dickkopf相關蛋白4(DKK4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 茄鏈格孢 5g
天冬氨酸β羥化酶(ASPH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 哈里法克斯希瓦氏菌 1g
分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 剛果嗜皮菌 250mg
序列相似家族3成員B(FAM3B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 赭色擲孢酵母 25g
含膠原三螺旋重復蛋白1(CTHRC1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黃蜜環(huán)菌 5g
AE結合蛋白1(AEBP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 馬葡萄球菌 1g
微管蛋白β1(TUBβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 農藥速測卡 5g
酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 大腸埃希氏桿菌 25g
花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 大腸埃希氏菌 5g
癌胚抗原相關細胞粘附分子6(CEACAM6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 桿狀毛霉 1g
線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 雜色曲霉 5g
F-框亮氨酸豐富重復蛋白3(FBXL3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 馬克斯克魯維酵母 100mg
脂肪酸合酶(FASN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 75% 鞘氨醇盒菌屬 100g
金屬硫蛋白1M(MT1M)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 75% 產(chǎn)氣腸桿菌 25g
Vasorin蛋白(VASN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 75% 假單胞菌屬 5g
大鼠雌二醇(E2)抗體elisa試劑盒石蠟切片組織蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡-LEPTIN TTF2(Transcription termination factor 2) 100 ul
細胞蛋白表達比色法定量-LEPTIN TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) 100 ul
細胞蛋白表達熒光定量-LEPTIN KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) 100 ul
蛋白表達西方雜交分析-LEPTIN TBX21(T-box transcription factor TBX21) 100 ul
蛋白免疫共沉淀分析-LEPTIN DKKL1(Dickkopf-like protein 1) 100 ul
細胞/組織裂解懸液、血液、體液等蛋白表達 C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) 20 ul
定量-LEPTIN TRIM22(E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22) 100 ul
FITC綠色熒光標記一抗 PRSS22(Brain-specific serine protease 4) 100 ul
TRITC紅色熒光光標記一抗 B7H6(B7 homolog 6) 1 Kit
HRP標記一抗 WNT10A(Protein Wnt-10a) 100 ul
前列腺腫瘤CAG三聯(lián)子定量 RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) 150 ul
人體腫瘤β－catenin突變巢式分析 PREX2(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 2 protein) 100 ul
人體腫瘤β－catenin突變熒光分析 PIM3(Serine/threonine-protein kinase pim-3) 20 ul
直腸腫瘤標記波形纖維蛋白糞便 ZFP36(Tristetraprolin) 100 ul
直腸腫瘤標記K－ras糞便檢測突變巢式分析 PORCN(Probable protein-cysteine N-palmitoyltransferase porcupine) 1 Kit
直腸腫瘤標記K－ras糞便檢測突變熒光分析 GDF1(Embryonic growth/differentiation factor 1) 5 mg
