選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒
英文名稱:Rat B-cell CLL/lymphoma 2,BCL2 ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
咪唑-2-甲酸乙酯 33543-78-1續(xù)斷(川續(xù)斷)甲狀旁腺激素(PTH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%(GC)
BOC-1,4-丁二胺鹽酸鹽 33545-98-1綿馬貫眾低氧上調(diào)節(jié)因子1(HYOU1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-溴-2-丁炔 3355-28-0滿山紅(興安杜鵑)視黃結(jié)合蛋白4(RBP4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96%
1-溴-2-丁炔 3355-28-0漏蘆(祁州漏蘆)線粒體甘油-3-磷酸?;D(zhuǎn)移酶(GPAM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96%
1-溴-2-丁炔 3355-28-0獐牙菜中間α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96%
1-苯基-3-氯-1-炔 3355-31-5槲寄生無孢蛋白(ASPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1-苯基-3-氯-1-炔 3355-31-5丁香過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1-苯基-3-氯-1-炔 3355-31-5大棗Gremlin 1蛋白(GREM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
N-乙?;?溴吲哚3乙酸酯 33588-54-4女貞子游離*狀腺原氨酸(fT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥97%
5-氨基-2-羥基吡啶 33630-94-3甘遂骺蛋白聚糖(EPYC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
5-氨基-2-羥基吡啶 33630-94-3石榴皮生長激素2(GH2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
2-氨基-4-羥基吡啶 33631-05-9全蝎核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
2-氨基-4-羥基吡啶 33631-05-9紅參神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
噻唑-4-甲 3364-80-5魚腥草線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
噻唑-4-甲 3364-80-5金櫻子保護素(CD59)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
豌豆凝集素(PSA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
蓖麻凝集素(RCA)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
扁豆凝集素(LCA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus delemar
菜豆凝集素(PHA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Clostridium tertium
大豆凝集素(SBA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus clavatus
花生凝集素(PNA)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
槐凝集素(SJA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
荊豆凝集素(UEA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒銅鐵試劑 SU,98.00%白介素1受體9抗體細胞硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒3-羥基-1,2,3-并三-4(3H)- 98%鹽酸阿米洛利丁酸鈉 98%RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗體細胞霉素乙?;D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性同位素薄層色譜(TLC)檢測試劑盒L-高氨酸 98%氟哌啶醇丁酸鈉 99%(GC),用于生物學Iroquois同源蛋白1抗體細胞霉素乙?;D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性同位素定量檢測試劑盒2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 99%替硝唑鄰二甲 ≥99%跨膜蛋白BRI抗體細胞霉素乙?;D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性熒光薄層色譜(TLC)檢測試劑盒1-羥基-7-偶氮并三氮唑 99%豬血管生成素1(ANG-1)Elisa測定試劑盒鄰二甲 99%跨膜蛋白ITM2C抗體細胞霉素乙?;D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性熒光定量檢測試劑盒N-羥基琥珀酰亞胺 98%血管緊張素Ⅱ受體抗體流式免疫組化鄰二甲 Standard for GC, ≥99.5% (GC)白細胞介素31抗體細胞絡(luò)氨酸磷酸酶(TP)活性比色法定量檢測試劑盒L-羥基脯氨酸 99%凋亡蛋白活性因子-1抗體流式免疫組化(C端)IHC WB1,2-二烷 99%人血清型免疫球蛋白A抗體細胞絡(luò)氨酸磷酸酶(TP)活性熒光定量檢測試劑盒L-羥脯氨酸甲酯鹽酸鹽 98%腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體流式免疫組化異佛爾 97%Irx3蛋白抗體細胞鎂離子濃度化學比色法定量檢測試劑盒組胺 96%溶菌酶抗體流式免疫組化
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。