選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
產品名稱:大鼠天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液?
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Streptomyces griseus 號: 34941-91-8
10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Bipolaris australiensis 號: 34941-91-8
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 號: 349-46-2
S100鈣結合蛋白A8(S100A8)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Bacillus badius 號: 349-46-2
S100鈣結合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Trichosporon beigii 號: 349-46-2
干擾素誘導T-細胞α亞族趨化劑(ITαC)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Flavobacterium sp. 號: 34946-82-2
SATB同源框蛋白1(SATB1)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 號: 34946-82-2
乳酸脫氫酶C(LDHC)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Paenibacillus tarimensis 號: 34946-82-2
CUB帶狀瘡疹透明區(qū)樣域蛋白1(CUZD1)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Monascus ruber 號: 349-58-6
貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)ELISA試劑盒 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 號: 349-58-6
生長停滯特異性蛋白6(GAS6)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Photobacterium phosphoreum 號: 34967-24-3
信號素3E(SEMA3E)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Undibacterium pigrum 號: 34967-24-3
抗凝血酶(AT)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Issatchenkia orientalis 號: 349-76-8
絨毛蛋白1(VIL1)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Bacillus subtilis 號: 349-76-8
前列腺干細胞抗原(PSCA)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Bacillus subtilis 號: 349-76-8
耐DDP鼻咽癌胞,1μg/mlLRRC4 腦瘤相關基因抗體300 ul
鼻咽癌細胞LRRK2 富亮氨酸重復激酶2抗體300 ul
轉lmpl基因鼻咽癌細胞LTA4H 白三烯A4水解酶抗體100 ul
SUNE-1亞株9-4TB4-R1/BLTR 白三烯B4受體1抗體300 ul
低分化鼻咽癌細胞LTB4-R2 白三烯B4受體2抗體300 ul
SUNE-1亞株-5-8FIumbrokinase 蚓激酶抗體300 ul
5-8轉基因鼻咽癌細胞系Lxn/Latexin 羧肽酶抑制劑抗體100 ul
SUNE-1亞株6-10BLXR alpha 肝臟X受體抗體100 ul
化學轉化小鼠鼻咽上皮細胞Ly-6G/Gr-1 淋巴細胞抗原6G抗體300 ul
結腸癌細胞LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗體100 ul
耐長春新堿結腸癌細胞,VCR終濃度1μg/mlLY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體100 ul
耐5氟尿嘧啶結腸癌細胞Lysozyme 溶菌酶抗體100µl
視網膜母細胞瘤Lyn 膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體100 ul
白血病阿霉素耐藥株Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體100µg
敘利亞倉鼠細胞系Phospho-Lyn (Tyr396) 磷酸化膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體300 ul
中國倉鼠卵巢懸浮細胞Phospho-Lyn (Tyr497) 磷酸化膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體300 ul
骨肉瘤細胞LYVE-1 淋巴管內皮透明質酸受體抗體300 ul
人肝癌細胞LYK5 蛋白激酶LYK5抗體300 ul
PACAP 檢測試劑盒 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽* 規(guī)格: 48T/96T
PAC3(Human plaet-associated Complement 3) 檢測試劑盒 血小板相關補體3* 規(guī)格: 48T/96T
PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) 檢測試劑盒 對氨基苯甲酸* 規(guī)格: 48T/96T
PABA(Human para-aminobenzoic acid) 檢測試劑盒 對氨基苯甲酸* 規(guī)格: 48T/96T
PA(Human prealbumin) 檢測試劑盒 前白蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
p53(Mouse p53/tumor protein) 檢測試劑盒 p53* 規(guī)格: 48T/96T
P53(Human p53/tumor protein) 檢測試劑盒 P53* 規(guī)格: 48T/96T
大鼠天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)elisa試劑盒小鼠抗環(huán)胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒溴脫氧尿苷抗體G蛋白信號轉導調節(jié)因子2抗原三溴化 99.9%IMDM培養(yǎng)基人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒,小鼠抗核小體抗體(IgG)免疫試劑盒腫瘤/抗原2.2抗體RhoA抗原三氟化乙酸絡合物 98%高氏合成一號瓊脂培養(yǎng)基人腎小球組織糖基化終末產物(GTE-AGE)ELISA試劑盒,小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒腫瘤/抗原2.3抗體RhoC抗原三氟化乙 46.5%XM-G瓊脂培養(yǎng)基人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒,小鼠抗核抗體IgG 免疫試劑盒腫瘤/抗原2.4抗體環(huán)指蛋白148抗原三氟化乙 98%半固體瓊脂發(fā)酵管人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒,小鼠抗弓形蟲抗體(IgG)免疫試劑盒腦鈉素/利鈉肽抗體Rho相關蛋白激酶1抗原三氟化四絡合物 48-50%溶液衛(wèi)矛半固體發(fā)酵管小鼠丙酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒,小鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒B Raf抗體Rho相關蛋白激酶2抗原三氟化乙胺絡合物 97%V-P半固體瓊脂發(fā)酵管小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒,小鼠抗單核細胞抗體(AMA)免疫試劑盒癌易感基因1抗體核受體RXRα抗原三氟化甲絡合物 50-52 wt% BF3 3% NaC1V-P半固體發(fā)酵管小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒,小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)免疫試劑盒癌易感基因2抗體6-磷酸山梨脫氫酶抗原丹皮酚 99%Korser氏肉湯發(fā)酵管小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒,
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。