公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素32(IL-32)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74452 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。?
樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
大鼠白介素32(IL-32)elisa試劑盒操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
白介素28A(IL28A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥99% 稻綠核菌 1g
生長分化因子2(GDF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥99% 葡萄座腔菌 5g
白介素17B(IL17B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 突孢毛殼 100g
成纖維細胞生長因子10(FGF10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 產(chǎn)黃青霉 25g
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 大腸埃希菌 5g
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 季也蒙假絲酵母 1g
趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 巴西果小克銀漢霉 25g
肝X受體α(LXRα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% Pseudomonas tremae 5g
翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 吉氏根瘤菌 100g
成纖維細胞生長因子9(FGF9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 洋蔥伯克霍爾德氏菌 25g
纖維膠凝蛋白1(FCN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 出芽短梗霉 5g
整合素β6(ITGβ6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 異常威克漢姆酵母 25g
核糖核酸酶A(RNASE1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 大腸埃希氏菌 5g
脂肪酸合酶(FASN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 黑曲霉 1g
汗酸酶αL(IDUα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% Cystofilobasidium 250mg
促凋亡蛋白1(APOPT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 黑曲霉 5g
巖藻糖變旋酶(FucM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99%,升華純化 球孢白僵菌 100mg
Nesprin 4蛋白(Nesp4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黑曲霉 250mg
血液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量 SIGIRR (Single Ig IL-1-related receptor) 100 ul
體液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量 NIM1K (Serine/threonine-protein kinase NIM1) 20 ul
細胞多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量 NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) 400 ul
組織多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量 SSBP2 (Single-stranded DNA-binding protein 2) 100 ul
血液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量 SFT2D1 (Vesicle transport protein SFT2A) 100 ul
體液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量 PGAM5 (Serine/threonine-protein phosphatase PGAM5, mitochondrial) 100 ul
植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量 HCN4(Potassium/sodium hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 4) 100 ul
純化線粒體NADH氧化酶活性定量 ATM(Serine-protein kinase ATM) 20 ul
細胞線粒體NADH氧化酶活性定量 SMURF2(E3 ubiquitin-protein ligase SMURF2) 100 ul
組織線粒體NADH氧化酶活性定量 SERBP1 (Plasminogen activator inhibitor 1 RNA-binding protein) 100 ul
細胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量 CAPN15 (Calpain-15) 100 ul
組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量 SGIP1 (SH3-containing GRB2-like protein 3-interacting protein 1) 100 ul
細胞NADPH氧化酶活性比色法定量 SH3BP5L (SH3 domain-binding protein 5-like) 20 ul
組織NADPH氧化酶活性比色法定量 SETX (Probable helicase senataxin) 100 ul
細胞過氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量 SHCBP1 (SHC SH2 domain-binding protein 1) 100 ul
組織過氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量 SAV1 (Protein salvador homolog 1) 100 ul